Question

埃博拉病毒（EBO）呈纤维状，EBO衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突（VP系列蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别。请回答下列问题：

（1）要获得编码GP蛋白抗原的基因疫苗，首先要提取出病原体的RNA，并利用RNA经______合成DNA，构建cDNA文库。cDNA文库中的基因______（选填“可以”、“不可以”、“部分”）进行物种间的基因交流。

（2）为了从牛分泌的乳汁中提取GP蛋白，需将GP蛋白基因通过______（方法）导入牛受精卵中。在基因导入牛受体细胞前，基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性表达的______，驱动转录过程。转基因牛是否培育成功，可以通过______技术从分子水平上进行检测。

（3）以GP蛋白作为疫苗比利用毒性减弱的埃博拉病毒作疫苗更安全，其原因是______。

（4）科研人员利用经EBO免疫后小鼠的______与小鼠的骨髓瘤细胞进行融合以形成杂交瘤细胞，培养后可以获得纯净的单一品种抗体，其特点是______，可以用此抗体与药物制成“生物导弹”抗击EBO。

Answer

逆转录 可以 显微注射法 启动子 抗原-抗体杂交 GP蛋白自身没有感染能力，但保留了抗原特性 B淋巴细胞 特异性强、灵敏度高、并可大量制备

【解析】

1、基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体。基因表达载体的组成包括：目的基因、启动子、终止子和标记基因等。目的基因导入动物细胞的方法是显微注射法。检测转基因生物目的基因是否表达--抗原-抗体杂交技术。

2、单克隆抗体的制备流程：人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，通过培养获得的杂交瘤细胞得到单克隆抗体。

（1）以RNA为模板合成DNA的过程为逆转录过程，该过程需要逆转录酶的催化；cDNA文件中的基因可以进行物种间的基因交流。

（2）将目的基因导入动物受体细胞一般采用显微注射法。为了从牛分泌的乳汁中生产GP蛋白，在基因导入牛受体细胞前，基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性表达的（乳腺蛋白基因的）启动子，才能驱动转录过程。转基因牛是否培育成功，可以通过抗原-抗体杂交从分子水平上进行检测。

（3）以GP蛋白作为疫苗比基因疫苗更安全，其原因是GP蛋白自身没有感染能力，但保留有抗原性。

（4）科研人员利用经EBO免疫后小鼠的B淋巴（效应B或浆）细胞与鼠的瘤细胞进行杂交，筛选后进一步培养的是杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生单一抗体，又能在体外快速增殖，其产生的单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高、并可大量制备。可以用杂交瘤细胞产生的抗体与药物制成“生物导弹”，抗击埃博拉。