Question

固定化酶是从20世纪60年代迅速发展起来的一种技术。东北农业大学科研人员利用双重固定法，即采用戊二醛作交联剂（使酶相互连接），海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶，研究固定化酶的性质，并对其最佳固定条件进行了探究。下图显示的是部分研究结果（注：酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率），请分析回答下列问题

（1）测定酶活力时可以用单位时间内、单位体积中反应物的__________或产物的________来表示。

（2）从对温度变化适应性和应用范围的角度分析，甲图所示结果可以得出的结论是_________

（3）乙图曲线表明浓度为________的海藻酸钠包埋效果最好。当海藻酸钠浓度较低时，酶活力较低原因是______________________________________________________________。

（4）固定化酶的活力随使用次数的增多而下降，由丙图可知，固定化酯酶一般可重复使用______________次，酶活力明显下降。

（5）固定小麦酯酶不仅采用海藻酸钠直接包埋，同时用戊二醛作交联剂，这是因为______________________________________________________________。

(6)分离纯化特定的酶，常使用的方法是凝胶色谱法和电泳法。使用凝胶色谱法分离酶，最先分离出来的是分子量________(大或小)的酶分子。使用电泳法分离酶，影响酶电泳速度的因素有____________________________________________________________________。

Answer

减少量 增加量 固定化酶比游离酶对温度变化适应性更强且应用范围较广 3% 海藻酸钠浓度较低时包埋不紧密，酶分子容易漏出，数量不足 3 酶分子很小，很容易从包埋材料中漏出 大 分子带电的性质的差异、分子本身的大小和形状不同等

【解析】

由图甲可知，固定化酶比游离酶对温度变化适应性更强且应用范围较广；由图乙可知，浓度为3％时，酶活力最好；由图丙可知，固定化酶使用三次之后，曲线明显下降。

（1）酶活力通常用底物的消耗量或产物的生成量表示。

（2）由甲图可知，当温度变化时，游离酶的酶活力比固定化酶变化明显，说明固定化酯酶比游离酯酶对温度变化适应性更强且应用范围较广。

（3）由乙图可知，浓度为3%的海藻酸钠包埋效果最好．当海藻酸钠浓度较低时，酶活力较低原因是海藻酸钠浓度较低时包埋不紧密，酶分子容易漏出，数量不足。

（4）由丙图可知，固定化酯酶一般可重复使用3次，之后若继续使用则酶活力明显下降。

（5）由于小麦酯酶分子很小，很容易从包埋材料中漏出来，因此固定小麦酯酶不仅采用海藻酸钠直接包埋，而是采用双重固定法。

（6）凝胶色谱法中分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快，所以最先分离出来的是分子量大的酶分子。电泳法是根据不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同分离蛋白质，所以酶电泳速度的因素有分子带电的性质的差异、分子本身的大小和形状不同等。