Question

科学家通过基因工程，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入到普通棉株细胞内，并成功的实现了表达，从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉。其过程大致如下图所示：

（1）基因工程的操作程序主要包括四个步骤，其核心是____________________。

（2）获取Bt毒蛋白基因的方法一般有________等（最少写出2种）。

（3）Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T-DNA，把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用了T-DNA的_________________________________________特点。Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现表达的过程，在基因工程中称为________。

（4）将目的基因导入受体细胞的方法很多，在该题中涉及到的方法是___________。

（5）一个基因表达载体的组成必须有__________、_________、___________、______、__________等五部分组成。

Answer

基因表达载体的构建 从基因文库中提取、PCR扩增、人工合成等 可转移到受体细胞并整合到受体细胞染色体DNA分子上 转化 农杆菌转化法 目的基因 标记基因 启动子 终止子 复制原点

【解析】

进行基因工程操作一般要经过的四个步骤是：目的基因的获取；基因表达载体的构建（或目的基因与运载体结合）；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定。

（1）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建。

（2）获取目的基因的方法有从基因文库中获取、PCR技术扩增、人工合成等。

（3）农杆菌的T—DNA具有转移到受体细胞并整合到受体细胞染色体DNA上的能力；目的基因在受体细胞中表达的过程称为转化。

（4）将目的基因导入到植物细胞的方法有农杆菌转化法和花粉管通道法，本题使用的是农杆菌转化法。

（5）基因表达载体的组成成分包括目的基因、启动子、终止子、标记基因、复制原点。