Question

近年基因编辑技术在基因治疗的应用领域展现出极大的应用前景。

（1）大部分基因治疗的临床试验，都是先从病人体内获得某种细胞，例如淋巴细胞，进行培养，然后在体外完成基因转移，再筛选成功转移的细胞扩增培养，最后重新输入患者体内。上述方法称为________基因治疗。

（2）用 技术治疗遗传病的基本过程是：根据遗传病致病基因的序列设计一段（即），将该与蛋白结合形成复合体，并导入患者细胞中，导入方法与外源基因导入人体细胞相似，可采用________法；进入细胞后的复合体在的指引下按照________原则准确地结合在致病基因部位，而蛋白则对致病基因进行切割。由此可见蛋白应该是一种________酶。

（3）治疗中不能对患病个体的每个细胞都注射该复合体。研究人员选用动物病毒为运载体，从而使复合体在运载体的协助下能够大量主动进入人体细胞，但在使用前需要对运载体进行________处理，以保证其安全性。该运载体进入人体细胞的方式通常是________。

Answer

体外 显微注射 碱基互补配对 限制性核酸内切 灭毒（或减毒） 胞吞

【解析】

1、基因工程的工具：①限制酶，能识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；②DNA连接酶，连接两个核苷酸之间的磷酸二酯键；③运载体，质粒是最常用的运载体，除此之外，还有λ噬菌体衍生物、动植物病毒。

2、基因治疗：把正常的基因导入病人体内有缺陷的细胞中，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。基因治疗分为体外基因治疗和体内基因治疗两种类型。

（1）基因治疗分为体外基因治疗和体内基因治疗两种类型。体外基因治疗：先从病人体内获得某种细胞进行培养，然后在体外完成基因转移，再筛选成功转移的细胞扩增培养，最后重新输入患者体内。体内基因治疗：用基因工程的方法直接向人体组织细胞转移基因的方法。题干中基因治疗的方法属于体外基因治疗。

（2）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；进入细胞后的复合体在RNA的指引下，按照碱基互补配对原则准确的结合在致病基因部位；Cas蛋白可对致病基因进行切割，基因的本质是有遗传效应的DNA片段，由此可见，Cas应该是一种限制性核酸内切酶。

（3）利用动物病毒侵染动物细胞的特性，可选用动物病毒为运载体，从而使复合体在运载体的协助下能够大量主动进入人体细胞，但为了防止病毒的致病性，在使用前需要对运载体基因灭毒（或减毒） 处理，以保证其安全性。该运载体是大分子物质，进入人体细胞的方式通常是胞吞。