Question

利用 PCR 技术将某小段 DNA 分子扩增 n 代，需

A. 测定 DNA 分子两端的核苷酸序列，以便设计引物对

B. 2n－1 个引物参与子代 DNA 分子的合成

C. 向反应体系中加入解旋酶、DNA 聚合酶等

D. 保持反应体系温度恒定，确保扩增的正常进行

Answer

A

【解析】

关于PCR技术的相关知识：

1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；

2、原理：依据DNA双链复制的原理；

3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成一对引物；

4、过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

利用PCR技术扩增DNA时需要引物的参与，因此需要测定DNA分子两端的核苷酸序列，以便设计引物对，A正确；DNA分子复制方式为半保留复制，因此（2n－1）对引物参与子代DNA分子的合成，B错误；PCR技术中双链DNA解开不需要解旋酶，且PCR扩增DNA分子是在较高温度下进行的，因此需要热稳定DNA聚合酶，C错误；PCR扩增的过程为高温变性、低温复性、中温延伸，可见整个过程中并不要保持恒温，D错误。