Question

白细胞介素4(IL－4)是具有多种免疫学调节功能的细胞因子，临床及研究中需要大量高纯度的IL－4，以及其高效检测试剂。下图是利用单克隆抗体技术制备抗IL－4特异性抗体的过程。回答相关问题。

(1)在免疫系统组成中，IL－4属于免疫活性物质。研究人员从外周血中提取到IL－4蛋白分子的mRNA。将其反转录成________，其中________(填“有”或“无”)启动子和终止子。并构建特定表达载体，利用工程菌获得用于临床及研究需要的高纯度的IL－4蛋白。

(2)图中所示的a培养瓶中培养的是________细胞，其与M细胞融合产生双核或多核细胞。再经________才能形成两个新的单核杂交细胞。

(3)b培养瓶所示过程中，常用________诱导细胞融合，再用特定的方法对其中细胞进行筛选。c中培养的细胞应具有________特点。经d培养的细胞，其培养液中除了加基本的营养物以外，还需要加抗生素、动物血清等，其中加动物血清的目的是____________________。

(4)从d或小鼠体内抽取的抗IL－4抗体的特点是__________。

Answer

cDNA 无 骨髓瘤 有丝分裂 灭活的病毒 既能无限增殖，又能产生特定的抗体 补充配制的培养基中缺乏的营养成分及一些激素 特异性强、灵敏度高、可以大量制备

【解析】

单克隆抗体制备流程：（1）对小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠产生免疫反应；
（2）得到相应的B淋巴细胞；（3）将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选；（4）在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长（这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体）；（5）对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞；（6）最后，将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖，这样，从细胞培养液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体。分析图示可知，M为具有免疫能力的B淋巴细胞（效应B细胞或浆细胞）、a为骨髓瘤细胞，b过程为细胞融合获得杂交瘤细胞，c过程为对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，d为将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，e表示表示将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔培养。

（1）对于真核基因而言，转录形成mRNA中遗传信息来自于基因中的外显子中的遗传信息，所以将mRNA反转录形成的是 cDNA，不含启动子和终止子。

（2）根据以上分析已知，图中a瓶中是骨髓瘤细胞，M是免疫过的B淋巴细胞，两者合产生双核或多核细胞，再经有丝分裂，进一步形成两个新的单核杂交细胞。

（3）b培养瓶中诱导细胞融合常用灭活的病毒；c过程为对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，得到的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特定的抗体。体外培养杂交瘤细胞时，培养液中需要加入动物血清，以补充配制的培养基中缺乏的营养成分及一些激素。

（4）从d或小鼠体内抽取的抗IL－4抗体为单克隆抗体，具有特异性强、灵敏度高、可以大量制备的特点。