Question

毒死蜱（C₉H₁₁C₁₃NO₃PS）是一种有机磷杀虫剂，长期使用将导致土壤中农药残留严重．某研究小组从长期施药的韭菜温室土壤（偏酸性）里分离出能降解毒死蜱的，并对其降解特性进行初步研究．请回答：

（1）用于分离木霉菌种的培养基属于___培养基．配制此培养基时，应加入___作为唯一碳源．

（2）制备培养基的操作顺序是_____________________（用下列字母和箭头排序）

a.倒平板  b.计算  c.熔化  d.称量   e.灭菌

（3）接种前，将培养基在适宜温度下放置适当的时间，观察培养基______，以确定培养基是否被污染．

（4）为了统计木霉活菌的数目，应采用的方法是________，首先需将水样进行适当稀释，例如取水样 1 mL加入无菌水________mL 制备稀释倍数为 10 ² 的稀释液，并照此依次制备更高倍数的稀释液。整个过程中，都要在________操作。 统计出0.2mL的稀释液在稀释倍数为10⁵的平板上的平均菌落数为40个，则每mL样液中的菌落数为___个．用此法测定木霉数量，实际活菌数量要比统计的菌落数量___。

Answer

选择 毒死蜱 b→d→c→e→a 是否产生菌落 稀释涂布平板法 99 火焰旁 2×107 多

【解析】

选择培养基的选择原理为：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。判断培养基灭菌是否合格的方法为：将未接种的培养基和接种后的培养基放入恒温箱中培养一段时间，若未接种的培养基上无菌落，表明培养基灭菌合格。

（1）要分离出能降解毒死蜱的木霉，需要以毒死蜱作为唯一碳源的培养基，在该培养基上只有能降解毒死蜱的木霉能生存，其它微生物都不能生存，因此该培养基属于选择培养基。
（2）制备培养基的顺序为b计算→d称量→c熔化→e灭菌→a倒平板。

（3）为了检验培养基灭菌是否合格，需在接种前，将培养基在适宜温度下放置适当的时间，观察培养基是否产生菌落，以确定培养基是否被污染。