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某人想利用细胞体外培养方法验证胰岛a细胞分泌的胰高血糖素能促进胰岛β细胞分泌胰岛...

某人想利用细胞体外培养方法验证胰岛a细胞分泌的胰高血糖素能促进胰岛β细胞分泌胰岛素。

材料:胰岛a细胞、胰岛β细胞、高血糖动物细胞培养液、低血糖动物细胞培养液。

1)实验思路:

①实验组:用____________(填:“高”或“低”)血糖动物细胞培养液培养__________,一段时间后过滤得到细胞和滤液__________

②对照组:__________

③一段时间后,__________

2)分析与讨论:

①实验操作时,往往使用_____________方法进行细胞和滤液的分离。若要进一步探究胰高血糖素对不同浓度葡萄糖(02.816.7mmo/L)培养条件下胰岛β细胞分泌胰岛素的影响,还需增设___________组。

②胰高血糖素能够与胰岛β细胞的__________结合,从而促进胰岛素分泌,从血糖变化角度分析,胰高血糖素能促进胰岛β细胞分泌胰岛素的原因是___________

③某糖尿病患者进食后,胰岛素分泌增高较多,但血糖下降缓慢。下列不属于其病因的叙述是________

A.自身抗体与胰岛素结合

B.靶细胞膜上载体对葡萄糖的转运能力下降

C.自身效应细胞毒性T细胞持续杀伤胰岛β细胞,导致胰岛素分泌不足

D.自身抗体竞争性结合靶细胞膜上的胰岛素受体

 

①低 胰岛a细胞 取适当滤液培养胰岛β细胞 ②对照组:取等量低血糖动物细胞培养液培养胰岛β细胞 ③测定两组培养液中胰岛素的含量 ①离心 4 ②表面受体 胰高血糖素升高血糖后,葡萄糖要用于供给组织细胞,需要胰岛素促进组织细胞对葡萄糖的摄取、利用。 ③C 【解析】 调节血糖的激素包括:胰岛素、胰高血糖素、肾上腺素,其中胰岛素降低血糖,胰高血糖素和肾上腺素升高血糖。 当血糖含量升高时,会刺激胰岛β细胞分泌胰岛素;血糖含量下降时,将刺激胰岛a细胞分泌胰高血糖素。 Ⅰ型糖尿病的病因一般是患者的胰岛β细胞受损,导致胰岛素分泌量减少; 胰岛素是一种激素,激素只能作用于靶细胞或靶器官,因为特定细胞的细胞膜表面存在相应的受体,而Ⅱ型糖尿病就是由于胰岛素受体受到影响引起的。 (1)该实验是为了验证胰岛a细胞分泌的胰高血糖素能促进胰岛β细胞分泌胰岛素,所以先在培养液中胰岛a细胞,因为胰岛a细胞分泌的胰岛血糖素能使血糖浓度升高,培养一段时间后培养液中的血糖浓度应稍微升高,此时再用此培养液培养胰岛β细胞。实验应遵循单一变量原则,应用等量的低糖动物细胞培养液培养胰岛β细胞,因为胰岛a细胞培养液是单一变量。如果实验结果实验组的胰岛素含量明显高于对照组,就说明了验证胰岛a细胞分泌的胰高血糖素能促进胰岛β细胞分泌胰岛素。 具体实验方案如下: ①实验组:用低血糖动物细胞培养液培养胰岛a细胞,一段时间后过滤得到细胞和滤液,取适当滤液培养胰岛B细胞。 ②对照组:用等量的低血糖动物细胞培养液培养胰岛β细胞。 ③一段时间后测定两组培养液中胰岛素的含量。 (2)分析与讨论: ①实验操作时,往往使用离心的方法进行细胞和滤液的分离。若要进一步探究胰高血糖素对不同浓度葡萄糖(0、2.8、16.7mmo/L)培养条件下胰岛β细胞分泌胰岛素的影响,还需增设4组。 ②胰高血糖素能够与胰岛β细胞膜表面的受体结合,从而促进胰岛素分泌,从血糖变化角度分析,胰高血糖素能促进胰岛β细胞分泌胰岛素的原因是胰高血糖素升高血糖后,葡萄糖要用于供给组织细胞,需要胰岛素促进组织细胞对葡萄糖的摄取、利用。 ③某糖尿病患者进食后,胰岛素分泌增高较多,但血糖下降缓慢。如果自身效应细胞毒性T细胞持续杀伤胰岛β细胞,会导致胰岛素分泌不足,由题意可知,胰岛素浓度没有下降,说明胰岛β细胞没有受损,故选C。
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考点分析:
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3)将选出的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔制备单抗腹水,一段时间后收集并纯化腹水,进行抗体效价和类型的测定。也可对克隆的杂交瘤细胞进行____________,更能持久地得到单一的抗体。单抗比一般抗血清优越得多,原因是____________

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