Question

为了研究水稻是否感染了某种抗寒能力比较强的细菌，下列叙述正确的是

A.为了筛选出该细菌，需要配制LB 液体培养基

B.利用涂布分离法计数的结果比实际值往往偏大

C.纯化培养该细菌时，培养皿应倒置放在恒温培养箱内的摇床上培养

D.在筛选该细菌的过程中，倒平板、接种和培养都必须在无菌条件下操作

Answer

D

【解析】

1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：

（1）计算：依据是培养基配方的比例。

（2）称量：牛肉膏比较黏稠，可同称量纸一块称取。牛肉膏和蛋白胨易吸潮，称取时动作要迅速，称后及时盖上瓶盖。

（3）溶化：牛肉膏和称量纸+水加热取出称量纸→加蛋白胨和氯化钠→加琼脂（注意：要不断用玻璃棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂）→补加蒸馏水至100mL。

（4）调pH；

（5）灭菌：培养基采用高压蒸汽灭菌，培养皿采用干热灭菌。

（6）倒平板。

2、无菌技术的主要内容

①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；

②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌

③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；

④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

A、筛选抗寒能力比较强的细菌需要配置LB固体培养基，并进行低温处理，A错误；

B、由于两个及以上的细菌可能形成一个菌落，故利用涂布分离法计数的结果比实际值往往偏小，B错误；

C、纯化培养该细菌时，培养皿不能放在摇床上培养，C错误；

D、在筛选该细菌的过程中，倒平板、接种和培养都必须在无菌条件下操作，D正确；

故选D。