Question

科研人员采用一系列现代生物科学技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产乙肝疫苗，其过程如下图所示。

请回答：

（1）图示中，过程A需要工具酶作用于DNA分子中的___________键，过程B可借助精密的显微操作仪和高效率的____________法。

（2）图示中重组DNA导入胚胎干细胞常用的方法是____________。受体细胞不选用乳腺细胞，而是选用胚胎干细胞的原因是___________。

（3）为确保安全鉴定性别和高效选育雌性，图中①~④供筛选的最佳对象是____________（填序号）。子代绵羊④是否实现转基因培育需求，可用____________作为特异探针对其乳汁进行检测。

（4）通常胚胎移植的最适宜时期是发育到____________细胞以上的胚胎。若对图示中③早期胚胎进行分割移植，则采用____________方式将胚胎细胞解离分散开。

Answer

（磷酸二）酯 细胞融合 显微注射 全能性易表达，克隆成功率高 ① 乙肝抗体 8 （胰/胰蛋白）酶处理/酶解

【解析】

1、基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达。

2、来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。

3、胚胎移植是指将雌性动物体内（供体）的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式提到的胚胎，移植到同一种的其他雌性动物（受体）体内，使之继续发育成新个体的技术。

（1）过程A是将目的基因和运载体结合形成重组DNA分子，需要DNA连接酶，形成磷酸二酯键，过程B运用核移植技术，需要精密的显微操作仪和高效率的细胞融合法。

（2）将重组DNA倒入胚胎干细胞常用显微注射法，乳腺细胞是已经分化的细胞不具有分裂能量，全能性低，而胚胎干细胞全能性易表达，克隆成功率高。

（3）进行性别鉴定最好选择早期①囊胚期的细胞，检测是否达到了转基因的目的，用抗原抗体杂交的方法，用乙肝抗体作为探针进行检测，

（4）胚胎移植需要发育到8细胞以上的早期胚胎，对胚胎进行分离需要胰蛋白酶处理，将其分散成单个细胞。