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中国T2DM(胰岛β细胞功能衰退型糖尿病)的发病率由1979年的1.00%上升2...

中国T2DM(胰岛β细胞功能衰退型糖尿病)的发病率由1979年的1.00%上升2019年的4.37%,补充胰岛素是控制和缓解病情的重要途径。胰岛素(由 αβ两条多肽链组成)的生产由提取动物胰岛素发展到了利用基因工程生产重组人胰岛素。

1)构建重组质粒时(如图所示),为避免目的基因 任意连接和运载体的自身环化应选用_____酶切处理目的基因和运载体。构建完 成的表达载体除了目的基因、标记基因以外,还必须有_____等组件。

2)利用大肠杆菌生产重组人胰岛素时,构建表达载体的目的基因应从_____文库中获取,重组大肠杆菌合成的人胰岛素原没有活性,需用_____酶将其加工成含αβ两条多肽链的胰岛素。

3)利用奶牛设计乳腺生物反应器生产人胰岛素,为使人胰岛素基因在奶牛乳腺中特异表达,构建表 达载体时应将目的基因与_____的启动子等调控组件重组在一起,并选用_____为受体细胞。

4)重组人胰岛素分子容易聚合而影响作用效果,可将胰岛素分子的氨基酸序列及结构进行局部调整 形成胰岛素类似物加以避免,请根据上述设想,补充完善其基本研发流程:预期蛋白质功能设计预期蛋白质的空间结构推测氨基酸序列_____构建表达载体,转基因获得胰岛素类似物。

 

SmaⅠ、PstⅠ 启动子、终止子、复制原点 cDNA 蛋白 奶牛乳腺蛋白基因 受精卵 推测氨基酸序列→找到相对应脱氧核苷酸序列(改造基因) 【解析】 分析题图:外源DNA分子中含有限制酶SmaⅠ、PstⅠ、AluⅠ的识别序列和切割位点,质粒中含有限制酶SmaⅠ、PstⅠ、AluⅠ、HindⅢ的识别序列和切割位点。 (1)外源DNA分子中含有限制酶SmaⅠ、PstⅠ、AluⅠ的识别序列和切割位点,其中限制酶AluⅠ的切割位点位于目的基因上,因此不能用该酶进行切割;若只用PstⅠ切割会导致目的基因和运载体自身环化或反向连接,因此同时构建重组质粒时,为避免目的基因任意连接和运载体的自身环化应选用SmaⅠ、PstⅠ酶切处理目的基因和运载体。基因表达载体的组成包括目的基因、标记基因、启动子、终止子、复制原点等。 (2)将真核基因导入原核生物时,一般从cDNA文库中获取目的基因;重组大肠杆菌合成的人胰岛素原没有活性,需用蛋白酶将其加工成含α、β两条多肽链的胰岛素。 (3)利用奶牛设计乳腺生物反应器生产人胰岛素,为使人胰岛素基因在奶牛乳腺中特异表达,构建表达载体时应将目的基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,并选用受精卵为受体细胞。 (4)重组人胰岛素分子容易聚合而影响作用效果,可将胰岛素分子的氨基酸序列及结构进行局部调整形成胰岛素类似物加以避免,这需要采用蛋白质工程技术,因此基本研发流程为:预期蛋白质功能→设计预期蛋白质的空间结构→推测氨基酸序列→推测氨基酸序列→找到相对应脱氧核苷酸序列(改造基因)→构建表达载体,转基因获得胰岛素类似物。
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考点分析:
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大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌,其代谢产物能与染料伊红美蓝反应,使菌落呈黑色。 测定水样是否符合饮用水卫生标准,常用滤膜法测定大肠杆菌的数目。流程如图所示:用滤膜过滤 待测水样水样中的细菌留在滤膜上将滤膜转移到伊红美蓝的培养基(EMB培养基)上培养统计菌落数目。

1)过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶,其中需要进行灭菌处理的是_____

2)从培养基功能上划分,EMB培养基属于_____培养基,为检测该培养基灭菌是否彻底,对于该培养基应采用的检测方法是_____

3)为检测严重污染水体中大肠杆菌数量,将水样适当稀释后,取样涂布在上述平板培养基中,应选 择颜色为_____的菌落进行计数。该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数,其原理是_____

4)该同学进一步思考,利用滤膜法也可能用于测定待测水样中其他微生物的数目。他取了两份水样,一份待测水样来自变酸的果酒,从中检测到两种微生物,它们在结构上的主要区别是_____ 另一份来自湖泊,若要通过测量蓝藻的数目来研究水华,则培养基配方中则必须添加_____无机盐碳源氮源)。

 

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如图是果蝇的部分基因在染色体上的分布图,其中果蝇复眼的颜色可受多个基因控制。 如某野生型红眼果蝇中发生不同位点基因突变,则会分别出现为 褐眼、猩红眼和白眼的个体。某研究小组在养殖的野生型红眼果 蝇种群中,偶然发现了一只伊红眼雄果蝇,并对果蝇复眼颜色的遗传进行了相关研究。

1)用该伊红眼雄果蝇与一只野生型红眼雌果蝇杂交,F1均为红眼,F1雌雄果蝇相互交配,F2中红眼:红眼:伊红眼281138141.由此杂交结果分析判断:

①控制伊红眼基因_____性基因;

②关于伊红眼基因位于什么染色体上可能存在的合理假说:_____

2)已知白眼果蝇是X染色体上相应基因发生隐性突变所致。若实验证实伊红眼基因也位于X染色 体上,为确定伊红眼基因与白眼基因是否为同一基因突变形成的等位基因,请设计一次杂交实验进行探究。

①实验思路:_____

②预期结果及结论:

_____,则说明两者为不同基因突变而成的非等位基因;

_____,则说明两者为同一基因突变而成的等位基因。

 

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先天性夜盲症是由多对等位基因控制的遗传病。X染色体的CACNA1F基因编码视杆细胞 的钙通道蛋白,若该基因突变则导致视杆细胞释放谷氨酸(神经递质)减少引起静止性夜盲症 常染色体上的GRM6基因编码的是谷氨酸受体蛋白,该基因突变则患进行性夜盲症。图甲、乙 两个家族分别出现了两种不同类型的夜盲症,且两家族成员之间不含另外一个家族的致病基因。根据 家系图,回答下列问题。

1)甲家族出现的是_____夜盲症,甲、乙两个家族所患夜盲症均具有_____遗传的特点,除此以外,甲家族的夜盲症还具有_____遗传的特点。

2)甲家族Ⅲ﹣1与乙家族Ⅲ﹣2结婚,所生孩子患夜盲症的概率是_____。产前诊断是预防遗传病 的有效手段,甲家族Ⅲ﹣2与乙家族Ⅲ﹣4结婚,_____需要不需要)对胎儿是 否携带致病基因进行筛查,其理由是_____

3)先天性夜盲症体现了基因对性状控制的关系:_____(写出两点)。

 

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依据下列相关实验,回答问题:

1)将离体叶绿体加入到具有氢受体DCPIP的水溶液中,给予光照后有氧气放出。反应的过程如下:

DCPIP(蓝色)+H2O→叶绿体光DCPIPH2(无色)+O2

(注:DCPIP是一种可以接受氢的化合物,在氧化态时是蓝色,在还原态时是无色)。

①上述反应过程中,能使DCPIP发生颜色变化的化合物是_____,该物质在_____类囊体薄膜叶绿体基质)产生。

②若上述反应过程在密闭条件下的蒸馏水中进行,则容器中O2浓度不能持续增加原因是_____

2)在密闭容器中,放入适量的小球藻和培养液,先通入18O2,后给予适宜的光照,一昼夜后,在小 球藻合成的有机物中检测到18O,试分析原因_____

 

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NAGase是催化几丁质(一种多糖)降解过 程中的一种关键酶,广泛存在于动物、植物、微生物中。研究发现一些糖类物质对NAGase催化活力有影响,如图1所示,请回答下列问题:

1)以果糖、蔗糖、半乳糖和葡萄糖作为效应物,这四种糖对NAGase的催化活力均有_____(填抑制促进)作用,其中影响该酶作用最 强的是_____

2)某小组开展实验探讨这四种糖影响该酶催化活力的机制,图2 是效应物影响酶催化活力的两种理论:模型A表示抑制剂与底物存在竞争关系,可以结合到酶的活性部位,并表现为可逆,但该结合不改变酶的空间结构;模型B表示抑制剂与底物没有竞争关系,而是结合到酶的其他部位,导致酶的空间结构发生不可逆变化。

3是依据这两种理论判断这四种糖类降低NAGase活力类型的曲线图,其中曲线a 表示不添加 效应物时的正常反应速率。请根据图3简要写出探究实验的实验思路,并根据可能的实验结果推断相应的结论。

实验思路:_____

 实验预期:若实验结果如曲线b,则为模型_____

若实验结果如曲线c,则为模型_____

 

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