Question

制备固定化酵母细胞的实验步骤是：酵母细胞的活化→配置CaCl₂溶液→配置海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞。请根据材料回答下列问题：

（1）这种固定酵母细胞的方法属于___法，一般固定化酶时不采用这种方法，原因是____________。

（2）活化指的是_____________________。该实验中为了避免活化时酵母细胞活化液溢出，需要将休眠状态的酵母菌加入到______中进行活化。

（3）加热溶解海藻酸钠时需注意用________加热，然后将溶化好的海藻酸钠溶液_________后，才能和酵母混合均匀。此外海藻酸钠的浓度对本实验结果影响较大，若浓度过高，则___________________。

（4）观察利用固定化酵母细胞发酵的葡萄糖溶液，根据___________________可对发酵效果进行初步的评价。

Answer

包埋 酶分子较小，容易从包埋材料中漏出 让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态 足够大的容器 小火间断 冷却至室温 不易形成凝胶珠 是否有气泡产生、是否有酒味

【解析】

采用包埋法制备固定酵母细胞的主要步骤：酵母细胞的活化（利用蒸馏水使干酵母恢复正常生活状态）→CaCl2溶液、海藻酸钠的配制（在溶解海藻酸钠溶液的过程中使用小火或间断加热，防止溶液焦糊）→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合（注意冷却海藻酸钠溶液至室温，防止高温破坏酵母菌的活性）→固定化酵母细胞。

（1）根据提供信息分析可知，这种固定化酵母细胞的方法属于包埋法；由于酶分子较小，容易从包埋材料中漏出，因此一般固定酶时不采用这种方法。

（2）酵母菌在缺水状态下处于休眠状态，活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态。该实验中为了避免活化时酵母细胞活化液溢出，需要将休眠状态的酵母菌加入到足够大的容器中进行活化。

（3）配制海藻酸钠溶液时，为了防止焦糊，应该小火间断加热；高温会导致酵母细胞死亡，因此海藻酸钠溶液必须冷却至室温后才能和酵母细胞混合。若海藻酸钠溶液浓度过高，不易形成凝胶珠。

（4）酵母细胞以葡萄糖为反应底物，通过发酵（无氧呼吸）产生酒精和二氧化碳。因此可以根据是否有气泡产生、是否有酒味对发酵效果进行初步的评价。