Question

甲醛是一种来源广泛的挥发性有机污染物，具有强烈的致癌和致畸作用，可利用微生物降解甲醛来治理甲醛污染，具有高效、环保、无二次污染等优点。如图甲是采集活性污泥作为优良菌源，通过筛选分离出能以甲醛为唯一碳源的高效降解菌的实验过程。分析回答下列问题：

    

（1）上述实验材料中，不需要进行灭菌处理的是___________，培养基灭菌的常用方法是____________。该实验③过程所用的选择培养基只能以甲醛作为唯一的碳源，其原因是____________________。

（2）由③→④的分离活性污泥中的细菌的接种方法（如图乙）为______________法，接种时，对接种环应采用______________方法进行灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始，这样做的原因是_____________________________________________________________________。

（3）为研究甲醛初始浓度对菌株降解能力的影响，进行了相应实验。当甲醛的初始浓度小于1200mg/L时，菌株可以完全降解甲醛：当甲醛的初始浓度增高至1600mg/L时，48小时后菌株对甲醛的降解能力很弱，甚至失去降解能力，其原因可能是___________________________________。

Answer

活性淤泥 高压蒸汽灭菌 只有能分解利用甲醛的微生物才能在此培养基上生长 平板划线法 灼烧 由于每个区域的末端的细菌比起点处少，每次从末端开始划线，会使得细菌的数量越来越少，最终得到单个细胞繁殖的菌落 甲醛的初始浓度太大，会产生毒害作用，使菌体蛋白质变性，从而降低了细菌降解甲醛的能力

【解析】

在分离和纯化分解甲醛的细菌的过程中，通过①过称制取各种菌的悬浊液，此过程中的活性污泥不需要灭菌操作，②过程可以获得各种微生物，③中的培养基中的碳源只含有甲醛，只有可以分解甲醛的细菌能够存活，所以通过③过程可以筛选出能分解甲醛的微生物，④过程可以获得单菌落，获得单菌落过程中常用的接种方法是平板划线法或者稀释涂布平板法；甲醛能使蛋白质变性，过高的甲醛浓度可以使分解甲醛的菌体白质变性，从而降低了细菌降解甲醛的能力。

（1）在微生物的培养过程中应该进行无菌操作，由于该实验是从活性污泥中分离菌种，因此对于活性污泥不能灭菌，培养基灭菌的常用方法为高压蒸汽灭菌法。③过程的培养基加入甲醛，甲醛是该培养基的唯一碳源，甲醛的作用是为能分解甲醛的微生物提供碳源，同时甲醛能抑制其他微生物的生长。

（2）对接种环常用的灭菌方法是灼烧灭菌；在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线的目的是将聚集的菌体逐渐稀释分散以便获得由单个细胞繁殖而来的菌落。

（3）甲醛能使蛋白质变性，过高的甲醛浓度可以使分解甲醛的菌体白质变性，从而降低了细菌降解甲醛的能力，因此如甲醛浓度过高，菌株对甲醛的能力降低。