Question

大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌，其代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色。下面是其培养基配方：

成分	蛋白胨	乳糖	磷酸二氢钾	琼脂	蒸馏水	2%的伊红水溶液	0.5%的美蓝水溶液
含量	10 g	10 g	2 g	20～30 g	1 000 mL	20 mL	13 mL

回答下列问题：

（1）该培养基中，蛋白胨为大肠杆菌提供的主要营养有______________和维生素。

（2）在接种大肠杆菌前，需先将灭菌后的空白培养基放在恒温箱中培养一段时间，观察是否有菌落生成，其目的是__________________________。

（3）为检测严重污染水体中大肠杆菌的数量，将水样适当稀释后，取样涂布在上述平板培养基中，应选择颜色为________的菌落进行计数。该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是______________________________________________。

（4）将1 mL水样稀释1 000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为____________。

（5）除利用特定培养基选择鉴定某种细菌外，还可以依据___________________________对细菌进行初步的鉴定和分类。

Answer

碳源、氮源 检测培养基制备是否合格(或灭菌是否彻底) 黑色 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌 3.8×108 菌落的形状、大小等菌落特征

【解析】

蛋白胨来源于动物原料，含有维生素、糖和有机氮等营养物质。为了检测培养基平板灭菌是否合格，在接种培养物前，可随机取若干灭菌后的空白平板先行培养一段时间。大肠杆菌的代谢产物能与培养基中的染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色。计数的关键是经梯度稀释后的稀释倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30～300之间的实验组平板进行计数。同种微生物表现出稳定的菌落特征，这些菌落特征包括菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等方面。

(1) 蛋白胨含有维生素、糖和有机氮等营养物质，可为大肠杆菌提供碳源、氮源和维生素。

(2) 为了检测培养基制备是否合格(或灭菌是否彻底)，在接种大肠杆菌前，需先将灭菌后的空白培养基放在恒温箱中培养一段时间，观察是否有菌落生成。

(3) 大肠杆菌的代谢产物能与培养基中的染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色。因此，为检测严重污染水体中大肠杆菌的数量，将水样适当稀释后，取样涂布在上述平板培养基中，应选择颜色为黑色的菌落进行计数。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌，因此可通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数。

(4) 将1 mL水样稀释1 000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为[(39＋38＋37)÷3]÷0.1×1000×1000＝3.8×108个。

(5) 同种微生物表现出稳定的菌落特征，因此可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定和分类。