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来那度胺是一种新型免疫调节剂,临床用于肿瘤的治疗,研究人员利用肿瘤细胞HepG2...

来那度胺是一种新型免疫调节剂,临床用于肿瘤的治疗,研究人员利用肿瘤细胞HepG2对其作用机理进行了相关研究。

实验材料:来那度胺(细胞实验中用DMSO溶解,动物实验中用橄榄油溶解)、淋巴细胞、HepG2细胞、胰蛋白酶、小鼠等。

1)实验一    实验目的:________________________

将贴壁生长的HepG2细胞用______处理,调整至恰当的细胞浓度,分别设置实验组合对照组。实验组分别加入等量的高剂量(15μmol·L)、中剂量(10μmol·L)、低剂量(1μmol·L)的来那度胺溶液,对照组加入等量的DMSO溶液。24h后测定细胞存活率,实验结果如下表。

浓度/μmol·L-1

0

1

10

15

细胞存活率/%

100. 0

98. 21

97. 12

96. 87

 

实验结果说明了来那度胺对HepG2细胞毒性很小。

2)实验二    研究来那度胺的免疫调节作用。

实验组:将HepG2细胞与___________按一定比例混合,_____________________

对照组:_____________________________________________________________________________

培养一段时间后统计各组肿瘤细胞的凋亡率。统计结果如下表,说明__________________

浓度/μmol·L-1

对照组

1

10

15

凋亡率/%

3

13. 4

29. 3

55. 3

 

3)实验三    研究来那度胺发挥免疫调节作用的机理

取生理状态一致的小鼠腋下移植1mL__________细胞悬液,1周后取移植成功小鼠进行实验,实验组分别用等量高、中、低剂量组的来那度胺溶液灌胃,对照组小鼠每次给予______灌胃给药,连续给药14d后处死小鼠,取肿瘤组织进行测量,发现实验组肿瘤组织明显小于对照组。检测相关物质的表达量,发现一方面组织内辅助性T细胞分泌的白细胞介素-2等多种蛋白质含量明显提高,有效促进了淋巴细胞的分裂分化。另一方面T细胞表面的PD-1蛋白和癌细胞表面的PD-L1蛋白表达量________T细胞表面的PD-1蛋白和癌细胞表面的PD-L1蛋白结合后可以抑制T细胞的活性,使其无法识别癌细胞),两方面都有效增强了淋巴细胞对肿瘤细胞的免疫杀伤作用。

 

研究来那度胺对HepG2细胞的毒性 胰蛋白酶 淋巴细胞 分别加入高、中、低剂量的来那度胺溶液 将HepG2细胞与淋巴细胞按一定比例混合,加入等量的DMSO 来那度胺能增强淋巴细胞对HepG2细胞的杀伤能力,且浓度越高杀伤能力越强 HepG2细胞 等量橄榄油 下降 【解析】 依题文可知,实验一中要根据自变量和因变量的内容来确定实验目的;实验二中根据实验目的写实验步骤时要遵循单一变量等实验原则;实验三中要利用题干信息“动物实验中用橄榄油溶解”解答。 (1)根据题文可知,实验一中的自变量是来那度胺的剂量,因变量是HepG2细胞的存活率,实验结果说明来那度胺对HepG2细胞毒性很小,由此该实验目的是研究来那度胺对HepG2细胞的毒性。贴壁生长的细胞用胰蛋白酶处理使其分开,从而调整细胞浓度。 (2)依题文可知,实验目的是研究来那度胺的免疫调节作用,再结合实验结果可以确定来那度胺能增强淋巴细胞对HepG2细胞的免疫力,所以自变量是来那度胺的有无,因变量是HepG2细胞的凋亡率。由此实验组:将HepG2细胞与淋巴细胞按一定比例混合,分别加入高、中、低剂量的来那度胺溶液;对照组:将HepG2细胞与淋巴细胞按一定比例混合,加入等量的DMSO;实验结论:来那度胺能增强淋巴细胞对HepG2细胞的杀伤能力,且浓度越高杀伤能力越强。 (3)依题文实验目的是研究来那度胺发挥免疫调节作用的机理,由此小鼠腋下移植的是HepG2细胞悬液,从而培育有免疫对象的实验鼠。依据实验目的可知要遵循单一变量原则,再有“动物实验中用橄榄油溶解”的信息,对照组小鼠需要每次给予等量橄榄油灌胃给药。据题文信息“T细胞表面的PD-1蛋白和癌细胞表面的PD-L1蛋白结合后可以抑制T细胞的活性,使其无法识别癌细胞”“两方面都有效增强了淋巴细胞对肿瘤细胞的免疫杀伤作用”可知,T细胞表面的PD-1蛋白和癌细胞表面的PD-L1蛋白表达量都下降。
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菌株

菌落直径/mm

透明圈直径/mm

A

18

36

B

31

59

C

19

57

 

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处理

气孔阻力(s·cm-1

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光合速率(μmol·m-2·s-1

蒸腾速率(mmol·m-2·s-2

正常处理

0. 73

1. 58

177. 5

18. 358

4. 504

轻度胁迫

0. 94

1. 36

198. 5

16. 796

3. 892

中度胁迫

1. 35

1. 24

257. 5

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