Question

用一定剂量的X射线照射小鼠，可以杀死其体内的淋巴细胞，当该小鼠接受其他小鼠的淋巴细胞时，可以利用这些淋巴细胞发挥免疫作用。用³H标记胸腺嘧啶可以使分裂细胞带上放射性标记，放射性标记可用设备测量。利用不同颜色荧光标记的抗免疫球蛋白抗体可以捡测细胞中各种特定抗体的含量。为研究特异性免疫中淋巴细胞的演化过程，研究人员设计了如下实验。请回答下列问题：

实验器材：100只同龄健康小鼠，抗原A溶液，抗原B溶液，抗原A、B混合溶液，红色荧光标记的抗免疫球蛋白A抗体，绿色荧光标记的抗免疫球蛋白B抗体，生理盐水，CO₂培养箱，放射自显影设备，注射器等。

（1）实验思路：

①给40只健康小鼠每一只注射等量且适量的³H标记的胸腺嘧啶，一段时间后，随机均分成A、B两组，给A组每一只注射等量且适量的抗原A溶液，给B组每一只注射等量的抗原B溶液。适当时间后分离两组小鼠的胸导管（是全身最大的淋巴管）淋巴细胞，分别在体外用_____________培养24h，备用。

②另取60只健康小鼠用一定剂量的X射线照射处理，随机分成C、D、E三组。向C组每一只小鼠体内输入等量且适量A组的淋巴细胞，向D组每一只小鼠体内输入_________________，向E组每一只小鼠体内输入_________________，作为对照。

③适当时间后，分别向C、D、E三组每一只小鼠注射_________________。适当时间后，分离C、D、E三组小鼠的胸导管淋巴细胞，并进行放射性检测。

④体外培养C、D、E三组小鼠的胸导管淋巴细胞，分别加入红色荧光标记的抗免疫球蛋白A抗体和绿色荧光标记的抗免疫球蛋白B抗体，显微镜下观察比较细胞中的颜色及深浅。

（2）实验结果：请补充下表中D组的实验结果①___________ ②___________ ③___________

组别	淋巴细胞放射性	淋巴细胞内颜色
红色	绿色
C	有	+ + + + +	+ +
D	①	②	③
E	没有	- -	- -

注：“+”表示阳性结果，“+”越多表示颜色越深，“-”表示阴性结果。

（3）结果C组小鼠淋巴细胞中红色和绿色都出现，说明细胞中合成了___________，而红色深得多是因为____________________________________________。

（4）结论：___________________是由淋巴细胞分化而来的，并且对抗原具有记忆性的记忆细胞也是由淋巴细胞分化而来的。

Answer

CO2培养箱 等量B组的淋巴细胞， 等量生理盐水 A、B两种混合抗原 有 + + + + + + + A抗体和B抗体 这些淋巴细胞在A组小鼠体内，已经被抗原A初次免疫过 产生抗体的细胞（浆细胞、效应B细胞）

【解析】

体液免疫过程为：

（1）感应阶段：除少数抗原可以直接刺激B细胞外，大多数抗原被吞噬细胞摄取和处理，并暴露出其抗原决定簇；吞噬细胞将抗原呈递给T细胞，再由T细胞呈递给B细胞；

（2）反应阶段：B细胞接受抗原刺激后，开始进行一系列的增殖、分化，形成记忆细胞和浆细胞；

（3）效应阶段：浆细胞分泌抗体与相应的抗原特异性结合，发挥免疫效应。

（1）①培养动物细胞、组织等要用CO2培养箱。

②实验要求单一自变量，C组每一只小鼠体内输入等量且适量A组的淋巴细胞，E组作为对照，应向每一只小鼠体内输入等量的生理盐水，则应向D组每一只小鼠体内输入等量B组的淋巴细胞。

③C组每一只小鼠体内输入A组的淋巴细胞（已被抗原A免疫过），D组每一只小鼠体内输入B组的淋巴细胞（已被抗原B免疫过）。适当时间后，分离C、D、E三组小鼠的胸导管淋巴细胞，并进行放射性检测，检测放射性可以检测是否有淋巴细胞的分裂，因此加入的应是抗原A、B混合溶液，抗原可刺激B淋巴细胞增殖分化，使细胞出现放射性。

（2）①D组小鼠淋巴细胞曾被抗原B免疫过，所以再次接受相同抗原时会迅速产生免疫反应，淋巴细胞会增殖分化，能检测到放射性，且二次免疫比初次免疫反应更强。

②对比C组的结果，为+ +。

③对比C组的结果，为+ + + + +。

（3）C组小鼠淋巴细胞中红色和绿色都出现，说明细胞中合成了A抗体和B抗体，而红色深得多是因为C组小鼠体内的淋巴细胞已经被抗原A初次免疫过，因此再次接受相同抗原时会快速产生大量的A抗体。

（4）实验最终检测的是抗体的量，因此考查的为产生抗体的细胞，即浆细胞（效应B细胞）。