Question

科研人员先分别PCR扩增尿酸酶基因和原核生物胞外蛋白信号肽基因(编码的肽链能引导新合成的蛋白质转移、分泌)，再将它们拼接形成融合基因，并导入大肠杆菌生产尿酸酶。相关叙述正确的是

A.两个基因拼接时需考虑两者的拼接方向和次序

B.融合基因可共用一个启动子和终止子

C.在导入融合基因前，应先用NaCl处理大肠杆菌，使其变为感受态细胞

D.该技术成功的标志是无需裂解大肠杆菌，在其培养液中就能收获尿酸酶

Answer

ABD

【解析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。

将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测和个体水平上的鉴定。

A、每个基因的两端都有启动子和终止子，它会调节基因的表达，因此扩增两类基因时可以通过设计引物来控制两类基因的拼接方向和次序，以便它们都能正常表达，A正确；

B、基因表达载体的组成包括目的基因、标记基因、启动子、终止子、复制原点，所以融合基因只要有一个启动子和终止子就可以正常表达，B正确；

C、感受态细胞的形成需要用用Ca2+处理，C错误；

D、大肠杆菌可以将尿酸酶释放至培养液，所以成功的标志是在培养液中就能收获尿酸酶，D正确。

故选ABD。