Question

我国生活饮用水卫生标准规定：接种1mL水样在牛肉青蛋白胨琼脂培养基上，经37℃、24h培养后，所生长出的菌落总数不得大于100。某兴趣小组对某蓄水池进行细菌总数测定，以了解池水是否符合饮用水卫生标准。回答下列问题：

（1）用三角瓶取水样前，可采用_________________(填灭菌方法)对三角瓶灭菌；取水池的水龙头用酒精擦拭后，再通过___________________的方法灭菌；在微生物培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑____________和渗透压等条件。

（2）该小组通过滤膜法测定细菌总数，将10mL的水样进行过滤后，将滤膜放在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上培养，培养时应将平板倒置，其目的是________________________________，经过24h培养，得到结果为：平板1中41个菌落、平板2中35个菌落、平板3中38个菌落，则所取水样测定结果_____________ (填 “符合”或“不符合”)饮用水的标准。

（3）若要鉴别水样中大肠杆菌，培养基中还应加入的非营养物是__________________，若要长时间保存大肠杆菌，可以采用________________________；使用过的培养基及其培养物必须经过处理后才能丢弃，以防止____________________________________。

Answer

高压蒸汽灭菌或干热灭菌 灼烧 温度、 pH 防止凝水滴落污染培养基 符合 伊红美蓝 甘油管藏法 培养物的扩散

【解析】

灭菌是指用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌，使用对象主要有接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等；消毒是指用较为温和的物理和化学方法杀死物体表面合或内部的部分微生物（不包括芽孢与包子），常用的方法主要有煮沸消毒法，巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法，使用对象主要有操作空间、某些液体、双手等。统计菌落数目使用的方法有显微镜直接计数法和活菌计数法，其中活菌计数法即稀释涂布平板法，一般选择菌落数目在30-300的平板进行计数。

（1）用无菌三角瓶取水样前，取样器（玻璃制品）需使用高压蒸汽 （干热灭菌）法灭菌；水龙头需要通过灼烧灭菌，在微生物培养过程中，需要合适的条件以利于微生物的生长，包括营养条件、温度、 pH和渗透压等。

（2）平板倒置后防止冷凝水滴落培养基，造成污染，影响实验结果；根据测定结构，10ml水中大肠杆菌的平均值为（41+35+38）/3=38，小于100，所以符合饮用水标准。

（3）鉴别大肠杆菌需要加入伊红美蓝试剂，使菌落呈黑色；长时间保存菌种，采用甘油管藏法；为防止培养物的扩散，对环境造成污染所以使用过的培养基及其培养物必须经过处理后才能丢弃。