白僵菌可感染农业害虫,因而可用来防治农业害虫。由于白僵菌对草丁膦(一种除草剂)敏感,且杀死害虫的能力较弱,科研人员将Bar基因(抗除草剂基因)和毒蛋白基因导入白僵菌进行基因工程改造,流程如图所示:
(1)从苏云金芽孢杆菌中获取的毒蛋白基因,通过_________技术可在体外大量扩增。该扩增过程所需添加的酶是________。
(2)图中形成重组质粒1时需要的限制酶是________;形成重组质粒2除了需要限制酶XbaⅠ外,还需要_______酶。
(3)将重组质粒2导入经_______处理成为感受态的白僵菌,一段时间后用含有______的培养基进行筛选,获得含有Bar基因的重组白僵菌。
(4)科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上,再________________,以判断重组白僵菌的杀虫效果。
今年非洲猪瘟导致大量生猪死亡,通过克隆猪来给生猪养殖户提供猪仔是一条值得探索的途径。早期胚胎细胞异常凋亡是目前克隆猪成功概率较低的主要原因,Bcl-2基因是细胞调亡抑制基因,用PCR技术可以检测该基因转录水平,进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图。请回答下列问题
(1)图中应选择减数第二次分裂中期的卵母细胞进行核移植,原因是_______________,为了保证正常的二倍体核型,使用的良种猪体细胞一般都选择__________代以内的细胞。
(2)图中X过程使用的酶是_______________,用PCR扩增Bcl-2基因。该技术的前提是要有一段已知__________________。根据这一序列设计合成引物,PCR扩增过程中使用的酶是_______________。
(3)在PCR过程中可检测出cDNA中Bcl-2cDNA的分子数,进而计算总mRNA中Bcl-2的分子数,从而反映出_______________________。
(4)胚胎移植中,应选择有__________________的个体作为受体母猪,并对受体母猪进行______处理。
如图为我国某农场的桑基鱼塘生态农业模式图,请据此图回答以下问题:
(1)该图中,可以体现生态工程的基本原理主要有___和___。
(2)该图中,要想通过基因工程培养抗病桑树,用___切割含有抗虫基因的DNA分子和运载体,再用___连接,构建基因表达载体,将基因表达载体导入桑树的叶肉细胞,再通过___技术将叶肉细胞培养成植株。
(3)该农场从国外引入几头良种猪,若想大量繁殖此良种猪,可采用___技术,该技术首先要对供体和受体进行___处理,然后给供体猪注射促性腺激素,使其___,从而获得更多的卵母细胞,然后培养至___期,与经过___处理的精子进行体外受精,得到早期胚胎,移植到受体猪体内。
栾树适合生长于石灰石风化产生的钙基土壤中,抗恶劣环境的能力强,因此常用于矿区废弃地恢复过程中的种植。为了增加栾树的耐旱性,某科研所将耐旱基因导入栾树中,流程图如下。回答下列相关问题:
(1)使用HindIII和BamHI在Ti质粒的_____上进行切割。经过②构建的产物称为____,经过③可形成具有_____能力的薄壁细胞,进而形成甲中的_____组织。
(2)③④⑤过程的基本原理是________,利用该技术可以实现快速大量繁殖优良品种的种苗,也可以获得单倍体幼苗,请说出二者在操作上的区别是____________________________。
(3)矿区废弃地恢复工程中,关键在于植被的恢复,以及为植被恢复所必需的_______的重建。最终为了使该地区具有较高的抵抗力稳定性,这体现了生态工程的_______原理。
35%~40%的甲醛水溶液(福尔马林)可作为防腐剂,其防腐的原理是使蛋白质变性。自然界中有能分解甲醛的细菌。下图为分离和纯化分解甲醛细菌的实验过程,请分析回答下列问题:
(1)②过程的目的是________,从功能上分,③属于_____培养基。
(2)上述实验中,不需要进行灭菌处理的是_________。
(3)由③→④的接种可选用平板划线法,在第二次及以后划线时,总是从上一次划线的末端开始划线的目的是_________。经过⑤过程后,取样测定甲醛浓度,选出________的培养瓶,再分离、培养菌株。
(4)为研究甲醛初始浓度对菌株降解甲醛能力的影响,进行了相应实验并得到如图所示结果。由图可知,当降解时间足够,甲醛的初始浓度低于1 200 mg/L时,__________________;当甲醛的初始浓度增高至1 600 mg/L时,48小时后菌株对甲醛的降解能力很弱,甚至失去降解能力,其原因可能是_____________。
我国生活饮用水卫生标准规定:接种1mL水样在牛肉青蛋白胨琼脂培养基上,经37℃、24h培养后,所生长出的菌落总数不得大于100。某兴趣小组对某蓄水池进行细菌总数测定,以了解池水是否符合饮用水卫生标准。回答下列问题:
(1)用三角瓶取水样前,可采用_________________(填灭菌方法)对三角瓶灭菌;取水池的水龙头用酒精擦拭后,再通过___________________的方法灭菌;在微生物培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑____________和渗透压等条件。
(2)该小组通过滤膜法测定细菌总数,将10mL的水样进行过滤后,将滤膜放在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上培养,培养时应将平板倒置,其目的是________________________________,经过24h培养,得到结果为:平板1中41个菌落、平板2中35个菌落、平板3中38个菌落,则所取水样测定结果_____________ (填 “符合”或“不符合”)饮用水的标准。
(3)若要鉴别水样中大肠杆菌,培养基中还应加入的非营养物是__________________,若要长时间保存大肠杆菌,可以采用________________________;使用过的培养基及其培养物必须经过处理后才能丢弃,以防止____________________________________。