近日，美国和澳大利亚的研究人员发现，从锥形蜗牛体内提取出的毒液可望帮助人类开发出超级速效的胰岛素。他们研究表明锥形蜗牛毒蛋白（Con-Ins Gl）能加速受体细胞信号转换，比人类胰岛素更加快速的发挥作用。因此制造这类“速效胰岛素”以及利用转基因技术实现批量生产成为I型糖尿病治疗的新思路．请回答下列问题：
（1）利用基因工程制造Con-Ins Gl这种速效胰岛素过程中，构建基因表达的载体一般包括目的基因、启动子、标记基因和 ______ ，标记基因的作用是 ______。
（2）为了获得目的基因可以通过提取分析Con-Ins Gl毒蛋白中的 ______ 序列推知毒蛋白基因的核苷酸序列，再用DNA合成仪直接大量合成。基因工程中需要DNA连接酶，根据酶的来源不同分为 ______ 两类。
（3）将人工合成的目的基因导入大肠杆菌体内，一般先用药物处理大肠杆菌使之成为 ______ 细胞．再将重组DNA溶于 ______ 中与该类细胞融合，在一定温度下促进细胞吸收重组DNA分子完成转化过程。
（4）经过目的基因的检测和表达，获得的Con-Ins Gl毒蛋白活性未能达到期待的“速效胰岛素”的生物活性，导致这种差异的原因可能是 ______ 。
泡菜在发酵期间，由于乳酸菌的发酵作用，发酵产物乳酸不断积累，因此可以根据微生物的活动情况和乳酸积累量，将泡菜发酵过程分为三个阶段。
（1）发酵初期：蔬菜刚入坛时，其表面带入的微生物，主要是不抗酸的大肠杆菌和酵母菌等。其中酵母菌的代谢类型为：__________________。最初酵母菌呼吸作用方式的反应方程式为__________________________________。发酵初期会有气泡从坛沿水槽内间歇性地放出，试说明原因：___________________________________________。
（2）发酵中期：由于初期乳酸发酵使乳酸不断积累，pH下降，厌氧状态形成。乳酸菌开始活跃，产生大量的乳酸，积累量可达到0.6% ~ 0.8%，pH为3.5 ~ 3.8。这一期间为泡菜完全成熟阶段，泡菜有酸味而且清香。此时坛内其它微生物的数量变化是_________（上升、稳定、下降），原因是：__________________________________。
（3）发酵后期：在此期间继续进行乳酸发酵，乳酸含量继续增加，可达1.0%以上。当乳酸含量达到1.2%以上时，发酵速度会逐渐变缓甚至停止，主要原因是____________________。此阶段泡菜酸度过高、风味已不协调。
据图回答
（1）生牛奶在饮用前一般要经过________处理，以保证人体健康。
（2）培养微生物时必须进行无菌操作，实验前所需的各种器材如培养皿等常用_______法灭菌。
（3）牛奶是微生物生长的良好培养基，为检测消毒前后牛奶中细菌含量的变化情况，做如图甲所做操作:用无菌吸管从锥形瓶中吸取1mL生牛奶稀释液至盛有9mL无菌水的试管中，混合均匀，如此再重复2次后，得到的溶液稀释度为_________________。
（4）配制的培养基在接种之前需进行无菌检测，具体做法是_____________________。
（5）图丙中统计的菌落数比实际活菌数_______，原因是_______________________。
（6）从培养基的作用来看，图丁所示的培养基称为_______，能起到分离微生物作用的原因是:_______。
请回答下列有关微生物培养，应用和保存以及物质提取的问题：
（1）微生物培养过程常用的对涂布器进行灭菌的方法是_____________。培养酵母菌常用到的培养基是____（填名称）。
（2）从土壤中分离尿素分解菌的过程中，应向以尿素为唯一氮源的培养基中加入____________指示剂。
（3）对于需要临时保藏的菌种，首先要将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，等菌落长成后，再_________。对于需要长期保存的菌种，可以采用__________的方法。
（4）从橘皮中提取橘皮精油常用的方法是___________法，从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是_______法。
乙醇等“绿色能源"的开发备受世界关注。利用玉米秸杆生产燃料酒精的大致流程为：
玉米秸杆预处理水解糖液发酵酒精
（1）玉米秸杆经预处理后，应该选用________酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。
（2）若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所需要的培养基为_____（按功能分），培养基中的碳源为________。
（3）从生物体提取出的酶首先要检测________，以便更好地将酶用于生产实践。在生产糖液的过程中，为了使酶能够被反复利用，可采用________技术，此技术一般不采用包埋法固定化的原因是________。
（4）发酵阶段需要的菌种是________，固定化细胞时需要________将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中。
环境污染物多聚联苯难以降解，受其污染的土壤中常同时存在重金属污染。研究发现联苯降解菌内的联苯水解酶是催化多聚联苯降解的关键酶。回答下列问题：
（1）为了从富含多聚联苯的环境中分离联苯降解菌，培养基中加入多聚联苯作为____________，该培养基属于____________（填“选择”或“鉴定”）培养基。用平板划线法纯化该细菌时，第1次划线及其以后划线总是从上次划线的末端开始是为了____________。
（2）为了能够反复利用联苯水解酶，可以采用____________技术，该技术的另一个优点是___________。
（3）若从联苯降解菌中分离并得到纯度较高的联苯水解酶，纯化该酶常用的方法是____________，采用该方法先分离出分子质量____________的蛋白质。
（4）下图中实线表示联苯水解酶催化的反应速度与酶浓度的关系，虚线表示在其他条件不变的情况下，底物浓度增加一倍，反应速度与酶浓度的关系，能正确表示两者关系的是____________。
