Question

一个由英国伦敦帝国学院和芬兰图尔库大学的科学家组成的研究小组日前开发出一种通过大肠杆菌制造丙烷的新技术。科研人员要对大肠杆菌进行研究和利用，首先要纯化大肠杆菌，请结合所学知识，回答下列问题：

（1）纯化大肠杆菌首先需要制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，其步骤是计算、称量、溶化、灭菌、______。对培养基进行灭菌的方法是_______________，检验培养基是否有杂菌污染的最有效方法是_________________。

（2）可以估算出样品中大肠杆菌数量的接种方法是_________，用该方法得到的结果一般比实际值_____（填“偏大”或“偏小”）。

（3）某实验小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因 是振荡培养能提高培养液中_____的含量和营养物质的利用率。使用过的培养基及培养物必须经过_______后才能丢弃，以防止培养物扩散。

（4）如果要检测食品中是否含有大肠杆菌，需要在培养基中加入_______（填物质），观察是否出现_____（填颜色）的菌落。

Answer

倒平板 高压蒸汽灭菌法 将未接种的培养基放在恒温箱中培养 稀释涂布平板法 偏小 氧气 灭菌处理 伊红美蓝 黑色

【解析】

微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）纯化大肠杄菌首先需要制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，其步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法。检验培养基有没有被杂菌污染，可选取未接种的培养基与接种样品的培养基同时在恒温箱中培养。如果在培养过程中未接种的培养基没有菌落生长，则说明培养基没有被杂菌污染；若未接种的培养基有菌落生长，则说明培养基被杂菌污染。

（2）接种大肠杆菌的最常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法，其中可以估算出样品中大肠杆菌数量的是稀释涂布平板法。由于两个或多个细胞连在一起，在平板上观察到的是一个菌落，因而该方法得到的结果一般比实际值偏小。

（3）大肠杆菌的培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、溶氧量、酸碱度和渗透压等条件；由于大肠杆菌对人和动物有一定的不利影响，所以对培养基和培养物要灭菌处理后才能丢弃。

（4）鉴定大肠杆菌要用伊红美蓝培养基，若出现黑色菌落，则说明食品中有大肠杆菌。