Question

研究发现，在奶牛饲料中添加纤维素酶制剂能增加奶牛采食量，显著增加瘤胃微生物。目前已发现一种纤维素酶高产菌株X。回答下列问题：

（1）纤维素酶是由至少3种组分组成的复合酶，其中_____________________酶可将纤维素分解成纤维二糖。奶牛饲料除了添加纤维素酶还会添加其他酶，协同作用下才能更好地破坏植物的细胞壁，原因是__________________________________。

（2）为了筛选微生物X，应先用含有纤维素粉的___________（填“液体”或“固体”）选择培养基对其进行扩大培养，该培养的目的是__________________。再用含有刚果红的鉴别培养基培养，通过是否产生____________________来筛选纤维素分解菌，为进一步确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行______________________的实验。

（3）在对微生物X进行计数时，使用________________________________法计数，统计的菌落数往往比活菌的实际数目低；为了保证实验结果准确，一般选择菌落数在__________的平板进行计数。

Answer

C1酶，Cx 植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶酶，酶具有专一性，纤维素酶只能分解纤维素 液体 增加纤维素分解菌的浓度 透明圈 发酵产纤维素酶 稀释涂布平板法（活菌计数法） 30～300

【解析】

本题考查了微生物的分离与培养以及纤维素分解菌的有关知识，要求考生识记培养基的基本成分以及培养基的制备过程，掌握微生物分离与纯化的方法，识记纤维素酶的种类以及对应的水解产物，再结合所学的知识答题。

（1）纤维素酶是由至少3种组分组成的复合酶，其中C1酶、CX酶可将纤维素分解成纤维二糖；由于植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，而酶具有专一性，纤维素酶只能水解纤维素，不能水解果胶，所以通常要添加果胶酶。

（2）为了筛选微生物X，应先用含有纤维素粉的液体选择培养基对其进行扩大培养，该培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度。若要筛选微生物X，应选用以纤维素作为唯一碳源并加入刚果红的培养基。纤维素分解菌产生的纤维素酶将纤维素分解，培养基出现透明圈，所以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌，为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验。

（3）对微生物X进行计数应使用稀释涂布平板法（活菌计数法），当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落，故稀释涂布平板法（活菌计数法）统计的菌落数往往比活菌的实际数目低；为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。