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许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ基因,其编码的产物β-半乳糖苷酶在X-gal和I...

许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ基因,其编码的产物β-半乳糖苷酶在X-galIPTG存在下,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞,过程如下图。请据图回答:

1)基因工程中,构建基因表达载体的目的是_____________________________________________

2)限制酶EcoRⅠ的识别序列和切点是—G↓AATTC—SmaⅠ的识别序列和切点是—CCC↓GGG—。图中目的基因被切割下来和质粒连接之前,需在目的基因的右侧连接相应的末端,连接的末端序列是__________,连接过程中需要的基本工具是________

3)转化过程中,大肠杆菌应先用_______处理,使其处于能吸收周围DNA的状态。

4)菌落的颜色为白色的是______,原因是_____________________________

5)菌落中的目的基因是否能表达,可采用的检测办法是_____________________

 

使目的基因在受体细胞中稳定存在,能遗传给后代,并表达和发挥作用 -TTAA DNA连接酶 Ca2+ 菌落③ lacZ标记基因区插入外源基因,不能表达出β-半乳糖苷酶,故菌落为白色 抗原—抗体杂交 【解析】 分析题图:目的基因的左侧有限制酶EcoRI的识别序列,右侧是限制酶SmaI的识别序列,而质粒上只有限制酶EcoRI的识别序列,所以需要用限制酶EcoRI来切割质粒,用限制酶EcoRI和SmaI来切割含有目的基因的外源DNA分子,这样就使目的基因右侧无法与质粒连接,所以目的基因被切割下来和质粒连接之前,需在目的基因的右侧连接限制酶EcoRI切割形成的末端,即-TTAA.用限制酶EcoRI切割质粒时,会破坏质粒上的lacZ'基因,但切割后的质粒自身环化后,lacZ'基因又被修复,能表达产生B-半乳糖苷酶,在X-gal和IPTG 存在下,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,所以菌落①②呈现蓝色;菌落③导入的是重组质粒,其lacZ'基因被破坏,不能表达产生B-半乳糖苷酶,在X-gal和IPTG 存在下,菌落颜色为白色。 (1)基因工程的核心步骤是构建基因表达载体,目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在,能遗传给后代,并表达和发挥作用. (2)由图可知,目的基因的左侧有限制酶EcoRI的识别序列,右侧是限制酶Sma I的识别序列,而质粒上只有限制酶EcoRI的识别序列,所以需要用限制酶EcoRI来切割质粒,用限制酶EcoRI和Sma I来切割含有目的基因的外源DNA分子,这样就使目的基因右侧无法与质粒连接,所以目的基因被切割下来和质粒连接之前,需在目的基因的右侧连接限制酶EcoRI切割形成的末端,即-TTAA,连接过程中需要DNA连接酶. (3)将目的基因导入大肠杆菌细胞之前,应先用Ca2+处理大肠杆菌,使其处于能吸收周围DNA的感受态. (4)用限制酶EcoRI切割质粒时,会破坏质粒上的lacZ'基因,但切割后的质粒自身环化后,lacZ'基因又被修复,能表达产生B-半乳糖苷酶,在X-gal和IPTG 存在下,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,所以菌落①②呈现蓝色;菌落③导入的是重组质粒,其lacZ'基因被破坏,不能表达产生B-半乳糖苷酶,在X-gal和IPTG 存在下,菌落颜色为白色. (5)检测目的基因是否表达产生蛋白质,可采用抗原一抗体杂交法.  
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考点分析:
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图甲是某草原生态系统中碳循环模式图,图中A、B、C、D表示生态系统的成分,①②③为特定的生理过程,图乙表示该系统中部分生物间的食物关系。请据图分析回答:

(1)图乙中的生物对应图甲中的__________(用字母表示),在②过程中碳主要以__________形式进行循环。

(2)如要调查该生态系统中矢车菊的种群密度,通常采用__________法。

(3)图乙中,若羊、鼠和食草昆虫粪便中的能量为M,呼吸作用消耗的能量为R,用于自身生长、发育和繁殖等生命活动的能量为N,则图中第二营养级的同化量可表示为__________

(4)该草原曾发生过火灾,但此后又慢慢恢复,该过程属于__________演替,从生态系统的角度分析,这体现了生态系统具有自我调节能力,这种能力的基础是__________

(5)生态系统的功能除图甲所示以外,还有____________________

 

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某兴趣小组对生长素相关应用和研究非常感兴趣,并对以下问题进行讨论:

1)茶文化在中国源远流长,采茶主要集中在春、秋两季。随着采摘批次的增加,新芽的数量大大增加,从生长素调节的角度看,原因是______________________________

2)下列四个图中,能正确反映生长素浓度与芽位置关系的是(侧芽1、侧芽2、侧芽3分别表示距顶芽的距离由近到远)________

3)番茄营养丰富,若正常传粉形成幼果后,用高浓度生长素喷洒幼果,可能出现的是__________

A.种子明显增多    B.形成无籽果实

C.部分果实脱落    D.果实较大

4)下面是研究生长素的三组实验设计示意图。

①根据实验1结果可知,切除尖端的幼苗,向左弯曲生长,其生长素最终来自______________________________________________________________

②如果实验1是为了研究幼苗尖端能产生生长素,且能促进幼苗下端生长,应补充的对照实验是_______________________________________________

③实验2中有一处明显的错误,改正为________________________________

④如果实验3是为了研究单侧光引起幼苗尖端生长素分布不均匀,请将实验3中的甲、乙两图补充完整。

_________________________

 

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图1为人体血糖浓度发生变化和受寒冷刺激后的部分调节过程示意图,A~D表示激素。图2为人体激素的两种作用机制示意图。回答下列问题:

(1)受到寒冷刺激时,皮肤中的____兴奋,引起皮肤血管收缩减少散热,同时激素B、C分泌量增多,机体代谢活动增强,增加产热,此过程的调节方式为____。若B增多则会抑制____的相关分泌活劫,造成相关激素分泌减少。

(2)在寒冷环境中,人体代谢增强,生成水分多,皮肤散失水分少,内环境的渗透压低,下丘脑合成和分泌的____激素少,肾小管和集合管对水分的重吸收少,尿量多。

(3)由图2可知,细胞膜上的蛋白质具有____功能。血糖浓度降低时,促进胰岛内的____细胞合成和分泌激素D,通过图2中的机制____促进肝细胞内糖原的分解和非糖物质转化为葡萄糖,从而升高血糖浓度。激素C与受体2结合形成的复合物促进DNA____形成物质b。

 

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下列关于细胞产物的工厂化生产的叙述,错误的是( )

A.细胞产物的工厂化生产是植物细胞工程的重要用途之一

B.培养过程中需要脱分化形成愈伤组织,然后悬浮培养愈伤组织细胞

C.培养的愈伤组织需要经过再分化产生特定的组织细胞后才能产生特定的细胞产物

D.培养的细胞收集后一般要破碎提取有效成分

 

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下列关于植物体细胞杂交的叙述,错误的是(  )

A.不同种植物原生质体融合的过程属于植物体细胞杂交过程

B.原生质体仍具有再生细胞壁,连续分裂并长成完整植株的能力

C.参与杂种细胞的细胞壁形成的细胞器主要是线粒体和核糖体

D.植物体细胞杂交技术可克服不同种植物之间的不亲和障碍

 

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