Question

为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：

（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是________；然后，将1 mL水样稀释100倍，在4个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，4个平板上的菌落数分别为29、39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为______。

（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过_____灭菌。

（3）示意图A和B中，_______表示的是用平板划线法接种培养后得到的结果。能够得到单菌落的是图示_________________。

（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中___的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。

（5）图B的接种工具是_______，如果B的菌种是某细菌，则一般稀释倍数为________倍。

Answer

检测培养基平板灭菌是否合格 3.8×107 灼烧 A AB 溶解氧 涂布器 104、105、106

【解析】

微生物接种常用的两种方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落，在稀释度足够高的情况下，每个菌落是由单个细菌繁殖而来，所以可以进行计数。

（1）微生物培养过程应该进行无菌操作，配制的培养基要进行高压蒸汽灭菌，可以将灭菌后的空白平板进行培养以检测培养基灭菌是否彻底，是否制作合格；由由题意知1ml水样中的菌落数是（39+38+37）÷3÷0.1×100=3.8×104个，每升水样中的活菌数3.8×104×103=3.8×107。

（2）对接种环常用的灭菌方法是灼烧灭菌。

（3）分析题图可知，A培养皿采用的接种方法是平板划线法，B培养皿采用的接种方法是稀释涂布平板法，二者都能得到单菌落。

（4）由题意可知，振荡培养比静置培养的细菌生长速度快，由此可以说明该细菌是需要菌，由于振荡培养提高l培养液中溶解氧的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率，细菌生长速度加快。

（5））图B表示的接种方法是稀释涂布平板法，接种工具是涂布器，如果B的菌种是某细菌，为了保证培养基上菌落的数目为30-300.则一般稀释倍数为104、105、106倍。