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某植物蛋白酶抑制剂Ⅱ基因是重要的抗虫基因,该基因转录的mRNA下游序列已知,但其...

某植物蛋白酶抑制剂Ⅱ基因是重要的抗虫基因,该基因转录的mRNA下游序列已知,但其上游序列未知。现利用PCR等技术扩增该基因,具体原理如下图所示,其中①〜③表示有关过程,Ⅰ〜Ⅲ表示有关物质。请回答下列问题:

(1)过程①反应体系中,需要加入__________种引物,还需加入__________酶,生成杂合链物质Ⅰ。

(2)利用DNA末段转移酶催化过程②,使cDNA单链左侧末端增加十多个腺嘌呤脱氧核苷酸序列(AAA(A)n),其目的是_________________,进而利于过程③扩增获得目的基因序列Ⅲ,过程③反应体系需要添加的新引物序列是____________________

(3)与物质Ⅲ相比,物质Ⅰ化学组成不同的是____________________。与过程③相比,过程①中碱某配对方式的不同之处是__________

(4)在物质Ⅲ的两端通常还需要增加__________序列,以便与相应的载体重组,再利用__________处理大肠杆菌等,以利于将重组质粒导入细胞,构建cDNA文库。

 

1 逆转录 便于设计引物 TTT(T)n 含核糖和尿嘧啶(U) U-A 限制酶识别 (冰冻的)Ca2+ 【解析】 试题据图分析,过程①表示以mRNA为模板逆转录形成DNA的过程,需要1种引物;过程②表示在DNA末段转移酶催化作用下,在cDNA单链左侧末端增加十多个腺嘌呤脱氧核苷酸序列(AAA(A)n)的过程;过程③表示利用PCR技术扩增目的基因的过程。 (1)根据以上分析已知,过程①表示以mRNA为模板逆转录形成DNA的过程,需要1种引物,且需要逆转录酶的催化。 (2)过程②在cDNA末端增加十多个腺嘌呤脱氧核苷酸序列(AAA(A)n),其目的是便于设计引物,因此在过程③扩增获得目的基因序列Ⅲ时,反应体系需要添加的新引物序列是TTT(T)n。 (3)据图分析可知,物质Ⅲ的两条链都是DNA链,而物质Ⅰ的一条链是DNA链、一条链是RNA链,因此物质Ⅰ化学组成与Ⅲ相比的不同之处在于物质Ⅰ含有核糖和尿嘧啶;且与过程③相比,过程①中特有的碱某配对方式是U-A。 (4)根据题意分析,过程③表示利用PCR技术扩增目的基因的过程,因此在目的基因(物质Ⅲ)两端通常还需要增加限制酶识别序列,以便限制酶的识别与切割;将重组质粒导入大肠杆菌前,需要先用钙离子处理大肠杆菌,使之成为感受态细胞。  
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栗斑腹鹀()是一种世界性濒危鸟类,多栖息于有矮树的山坡草地等中,主食植物种子,夏季也吃小型昆虫。某地区由于修建车道、开垦耕地、火烧等原因导致栗斑腹鹀种群生境破碎化(如图)。为研究生境破碎化后斑块面积及周边环境对栗斑腹鹀种群密度的影响,科研人员调查了该地区食物资源相似的4个斑块,结果如下表。分析回答:

 

斑块1

斑块2

斑块3

斑块4

面积(Km2

0.38

1.2

0.2

1.25

栗斑腹鹀数量

10

6

2

33

 

1)栗斑腹鹀属于生态系统中的_________(成分),其采食同化的碳元素,除通过呼吸作用释放到无机环境中外,还可流向____________________

2)请根据表中数据,在答题卡指定位置画出各斑块中栗斑腹鹀种群密度柱状图 __________

3)生境破碎化后4个斑块中的栗斑腹鹀种群是否存在地理隔离?____。理由是_________

4)根据本实验结果,你能得出的结论是______________________________

 

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棉花栽培中,适时打顶(去顶芽)是棉花高产栽培的关键技术之一。打顶解除了顶端优势,会改变棉株的生长中心,影响植株体内光合产物和矿质养分的分配,但打顶后棉株叶片在花铃后期出现早衰现象。科研人员研究了打顶后涂抹NAA对长绒棉结铃和产量的影响,结果如下表。请回答:

处理组

单株结铃数/个

单株成铃数/个

单株成铃率/%

单株产量/g

①不打顶

33.6

16.7

49.7

44.1

②打顶

29.6

19.3

65.2

56.9

③打顶+N0

29.3

19.2

65.5

57.7

④打顶+N1

37.0

29.7

80.3

71.9

⑤打顶+N2

27.0

17.0

62.8

47.9

 

注: N0:打顶后立即将空白羊毛脂放在切口;N1:打顶后立即将含浓度为3×10-3mmol·L-1NAA的羊毛脂放在切口;N2:打顶后立即将含浓度为3×10-2mmol·L-1NAA的羊毛脂放在切口。

(1)顶端优势体现了生长素生理作用具有_____________________

(2)处理②和③的实验结果相差不大,说明________________。处理④棉株的单株产量较高的原因是外源适宜浓度的NAA能____________,提高结铃数和成铃率。

(3)打顶后涂抹一定浓度的NAA既保证了打顶后棉株体内的合理的生长素水平,有利于更多的光合产物分配到________器官,又可避免因不打顶使棉株具有旺盛的顶端生长优势,从而使养分过多消耗在________器官上。

(4)为探究打顶后棉叶出现早衰现象的原因,科研人员在花铃后期检测了处理①、②、④组的棉株叶片内相关植物激素的含量变化,结果如图。据图分析,叶片出现早衰现象的原因是____________________,同时说明植物生命活动是多种激素____________的结果。

(5)综合研究结果,对棉花生产的指导意义是________________________

 

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感染人乳头瘤病毒(HPV)可诱发宫颈癌等恶性肿瘤。研究机构为评估某种HPV疫苗的效果,在志愿者中进行接种。一段时间后,统计宫颈癌出现癌前病变(癌变前病理变化,可发展为恶性肿瘤)的人数,结果见表。

组别

接种物

总人数

癌前病变人数

A(接种前未检出HPVDNA

A1

对照剂

7 863

83

A2

疫苗

7 848

4

B(接种前检出HPVDNA

B1

对照剂

1 125

126

B2

疫苗

1 121

125

 

回答下列问题:

1)为制备该疫苗,将HPV外壳蛋白L1基因与________连接,导入受体细胞。受体细胞将目的基因转录,再以_______为原料翻译出L1蛋白。这样就获得了疫苗的有效成分。

2)人体接种该疫苗后,____________作为抗原刺激机体产生特异性抗体。一旦HPV侵入机体,______会迅速增殖分化,产生大量抗体。这些抗体与游离的HPV结合,阻止HPV____。故A2组出现癌前病变的比例明显低于对照组。

3B1组人群中出现癌前病变比例显著高于____组,据此推测HPV是诱发癌前病变的因素之一。

4B2组与B1组人群出现癌前病变比例没有明显差异,原因可能是该疫苗未能明显诱导______清除体内HPV

5)综上所述,该疫苗可用于宫颈癌的_______

 

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胰岛B细胞是可兴奋细胞,存在外正内负的静息电位。其细胞外Ca2+浓度约为细胞内的10 000倍,细胞内K浓度约为细胞外的30倍。下图1为血糖浓度升高时,胰岛B细胞分泌胰岛素的机制示意图。请回答下列问题:

(1)据图1分析可知,葡萄糖通过________方式进入胰岛B细胞,氧化分解后产生ATP,ATP作为________,与ATP敏感的K通道蛋白上的识别位点结合,导致ATP敏感的K通道关闭,进而触发________。使胰岛B细胞兴奋,此时膜内电位发生的变化为________

(2)葡萄糖转运载体(GLUT)有多个成员,其中对胰岛素敏感的为GLUT-4,其作用机制如图2所示。

①GLUT1~3几乎分布于全身所有组织细胞,它们的生理功能不受胰岛素的影响,其生理意义在于______________,以保证细胞生命活动的基本能量需要。

②据图2分析,当胰岛素与蛋白M结合后,经过细胞内信号传递,引起________的融合,从而提高了细胞对葡萄糖的转运能力。胰岛素促进细胞内葡萄糖去向中的①和②指的是________________________________________________

 

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用微电极记录细胞膜上的电位变化是研究神经冲动产生、传导和突触传递原理的常用方法。根据以下实验方法和结果,分析和解决相关问题。

1)当图1中的微电极M记录到动作电位时,突触小泡将依次产生的反应是_________。突触后膜上将依次产生的反应是___________

2)研究表明,在突触小体未产生动作电位的情况下,微电极N上也会记录到随机产生的、幅度几乎相等的微小电位变化,如图2所示。结合突触的结构和突触传递的过程,分析导致该电位变化产生的原因:_____

3)在某些突触中,突触小体产生动作电位后,微电极N上记录到电位负值增大的抑制性突触后电位(IPSP),如图3所示。已知KC1通道都参与了IPSP的形成,IPSP产生的原理是___________

4)已知从刺激开始到动作电位产生有一短暂的延迟,且与刺激强度有关。为了规避该延迟对测量精度的影响,请利用微电极记录技术设计实验,精确测量动作电位在神经轴突上的传导速度:__________。(实验仪器:微电极记录设备、刺激器、计时器、刻度尺等。)

 

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