下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图中甲、乙中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的不再重复标注。请回答下列问题。
限制酶 | BamHⅠ | BclⅠ | Sau3AⅠ | HindⅢ |
识别序 列及切割 位点 | G↓GATCC CCTAG↑G | T↓GATCA ACTAG↑T | ↓GATC CTAG↑ | A↓AGCTT TTCGA↑A |
(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用限制酶为______,酶切后的载体和目的基因片段通过________酶作用后,获得重组质粒。
(2)若BclⅠ酶切的DNA末端与HindⅢ酶切的DNA末端可直接被DNA连接酶连接,原因是_______,这两种酶_____________(填“都能” “都不能”或“只有一种能”)切开连接的部位,原因是________________________。
(3)若用Sau3AⅠ切割图甲质粒最多可能获得______种大小不同的DNA片段。
(4)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加________平板上长出的菌落,常用PCR鉴定,所用的引物组成为图乙中的____________________________________。
红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是由血红蛋白完成,血红蛋白的主要功能是携带O2和CO2,我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题:
(1)血红蛋白的提取和分离一般可分为四步:________、粗分离、______和________。
(2)实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。
①加入柠檬酸钠的目的是_____________。
②以上所述的过程即是样品处理,它包括红细胞的洗涤、______________、分离血红蛋白溶液。
(3)收集的血红蛋白溶液要进行粗分离,其方法是___________。
(4)然后通过_____________法将样品纯化,样品纯化的目的是____________。最后经___________进行纯度鉴定。
(5)电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子的______、形状的不同,使带电分子产生不同的迁移速率,从而实现样品中各种分子的分离。
废纸主要成分是木质纤维。图甲是工业上利用废纸生产乙醇的基本工作流程。回答下列问题。
(1)自然界中①环节需要的微生物大多分布在_________的环境中。②中获得的酶是__________酶。
(2)若从土壤中分离出上述微生物,应以_________为唯一碳源的培养基进行培养,并加入_____________形成红色复合物进行筛选,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的_______。
(3)接种后一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示,推测接种时可能的操作失误是___。 向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口黏附有培养基,需要用酒精棉球擦净的原因是_。
(4)生产中可以满足④环节的常见菌种是_________。玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可为该微生物的生长提供______。
高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉嗜热菌样品中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如下图所示:
(1)进行①过程的目的是______________,②过程所使用的接种方法是___________法。
(2)从用途上来说,Ⅰ号培养基属于_________培养基,配制时仅以_______作为唯一碳源;从物理状态上来说,Ⅱ号培养基属于固体培养基,配制时应加入_________作为凝固剂。
(3)Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是___________________。一般对配制的培养基采用_____________法灭菌。
(4)培养一段时间后,应从Ⅰ号培养基上挑出______的菌落,接种到Ⅱ号培养基上。
腐乳是我国独特的传统发酵食品,是用豆腐发酵制成的,民间老法生产腐乳均为自然发酵,现代腐乳生产多采用优良的毛霉菌种进行发酵。现代化生产流程如下:
(1)毛霉的生长需要豆腐提供水、无机盐、____和____四大类基本营养物质。此外,还需要一定的温度、湿度等环境条件。
(2)民间制作腐乳时_____(填“需要”或“不需要”)灭菌,发酵好的豆腐上布满了菌落,这些菌落________(填“属于”或“不属于”)同一物种。
(3)流程中扩大培养时使用的培养基与毛霉菌种分离时使用的培养基最大的区别是后者培养基中加入了__________。
(4)当豆腐上长出毛霉后,对豆腐要进行___________。腐乳制作的后期要加入卤汤,其中酒的浓度要控制在12%左右,原因是酒的浓度过高,则______;酒的浓度过低,则不足以_______,可能导致豆腐腐败。
(生物——选修1:生物技术实践)你对泡萝卜酸黄瓜和酸豆角一定不陌生吧?一碟酸甜香脆的泡菜,能令人胃口大开。请根据所学知识回答下列问题。
(1)制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜,原因是新鲜蔬菜中__________________。
(2)制作泡菜所利用的菌种是______________,与酿造果酒所需菌种相比较,该菌种细胞结构上的主要特点是_____________。
(3)配制的盐水需煮沸,其作用是_________和_____________。
(4)测定亚硝酸盐含量的原理是亚硝酸盐与_______________发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成__________色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较,可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。
(5)提取亚硝酸盐的过程中使用的氢氧化铝乳液的作用是____________。