Question

人血清白蛋白（HSA）具有重要的医用价值，只能从血浆中制备。如图是以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径。请回答：

（1）获取HSA基因的方法有______________、_____________、_____________。若需要获得cDNA则首先需采集人的血液，提取血液中的_________。然后以cDNA为模板，采用PCR技术扩增HSA基因。

（2）下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向，请用箭头在方框内标出标出另一条引物的位置及扩增方向。

______________

（3）启动子通常具有物种及组织特异性，构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体，需要选择的启动子是_____________（填写字母）。

A.人血细胞启动子   B.水稻胚乳细胞启动子   C.大肠杆菌启动子   D.农杆菌启动子

（4）利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，需添加酚类物质，其目的是_______________。农杆菌中含有Ti质粒，其上有一段TDNA，这段DNA的作用是_______________________。

（5）为证明rHSA具有医用价值，须确认rHSA与______________的生物学功能一致。

Answer

从基因文库中获取 PCR技术扩增 人工合成 RNA(或mRNA) B 吸引农杆菌移向水稻受体细胞，有利于目的基因成功转化 将目的基因转移到受体细胞，并整合到受体细胞染色体DNA上 HSA

【解析】

基因工程的操作步骤：获取目的基因（基因文库、PCR、人工合成）；构建基因表达载体（含标记基因、启动子、终止子、目的基因、复制原点等）；把目的基因导入受体细胞（显微注射法、农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法、钙离子处理法）；目的基因的检测和鉴定（分子水平和个体水平检测，前者包括DNA分子杂交、分子杂交和抗原抗体杂交；后者如抗虫抗病接种实验）。

（1）获取HSA基因可以通过从基因文库获取、PCR扩增、人工合成等方法获取HSA基因。HSA只能在血浆中制备，故若需要获得cDNA，则需要先提取血液中的RNA，通过反转录合成cDNA，再采用PCR技术扩增HSA基因。

（2）根据两条链反向平行可知，另一条引物的结合位点应该在下面一条链的右侧，即。

（3）要让目的基因在水稻的胚乳细胞中表达，需要在目的基因的前面加上水稻胚乳细胞基因的启动子。

综上所述，ACD不符合题意，B符合题意。

故选B。

（4）常用农杆菌转化法将目的基因导入水稻细胞中，酚类物质吸引农杆菌移向水稻受体细胞，有利于目的基因成功转化。农杆菌中含有Ti质粒，其上有一段T-DNA，将目的基因转移到受体细胞，并整合到受体细胞染色体DNA上，故需要将目的基因插入到T-DNA上。

（5）rHSA是通过基因工程技术获得的，可以通过比较rHSA与HSA的生物学功能是否一致，来确定rHSA的医学价值。