下列对细胞生命历程的叙述,错误的是
A. 细胞分化的过程中细胞内表达的基因种类会发生改变
B. 细胞衰老的过程中有的细胞不会出现细胞核变大的现象
C. 细胞凋亡的过程中有的细胞可能与效应T细胞发生接触
D. 细胞癌变的过程中细胞内抑癌基因突变成原癌基因
癌细胞表面蛋白“PDL﹣1”与T细胞表面蛋白“PD﹣1”特异性结合后,可抑制T细胞活性并启动其凋亡,导致肿瘤细胞发生免疫“逃逸”。研究者对“PD﹣1”基因进行克隆、表达及生物学活性鉴定,为制备抗体打基础。研究中所用引物α和β碱基序列见图1、几种常用限制酶名称及识别序列与酶切位点见图2:
(1)首先提取细胞中的mRNA反转录生成_____作为模板:设计含有不同的限制酶切点的α和β序列为引物,通过_____技术扩增目的基因。
(2)选用图1中的两种名称分别为_____的限制酶将“pIRES2﹣EGFP质粒”载体进行双切,再用DNA连接酶将其与目的基因拼接,构建表达载体。该表达载体的组成,除了目的基因、标记基因抗卡那霉素基因外,还必须具有_____等
(3)而后一定温度下,与经过Ca2+处理的感受态大肠杆菌混合培养在含有_____培养基中,可筛选出已经完成转化的大肠杆菌,继续培养该种大肠杆菌以扩增重组DNA。
(4)将扩增后的“pIRES2﹣EGFP载体/PD﹣1重组DNA”转入可高度表达外源基因的原代293T细胞。一段时间后,为确定PD﹣1基因是否表达,检测细胞膜表面是否具有_____。为判断其是否具有生物学活性和功能,则可裂解293T细胞,提取该物质看能否与_____发生结合,从而阻断“PD﹣1与PDL﹣1信号通路”。研究中还会有一步骤,只将“pIRES2﹣EGFP载体”转入293T细胞,其目的是_____。
[生物—一选修l:生物技术实践] 为了调查厦门自来水的质量情况,某研究小组对自来水水样中的细菌含量进行了测定,请回答下列问题:
(I)在微生物的培养过程中,对培养基灭菌常用的方法是__。为防止冷凝水影Ⅱ向细菌的生长,需将培养皿____培养。
(2)若小组采用平板划线法分离水样中的细菌,在培养基上共画了5个区域,则至少需要__次灼烧接种环。
(3)可通过滤膜法检测自来水中大肠杆菌的数量,将已知体积的水过滤后,将滤膜放在____培养基上培养。该培养基除了为大肠杆菌的生长繁殖提供水和碳源外,还应提供____等基本营养成分。
(4)某同学采用稀释涂布平板法统计菌落数目,菌落分布如图所示,推测该同学可能的操作失误是___。
蚕蛾染色体(2n=56),ZW型性别决定。一种罕见的黑体雄蛾与常见的浅色体雌蛾杂交,F1为黑体。F1互交,F2所有雄蛾都是黑体,而雌蛾中一半为浅色体。用A、a表示不同体色基因。回答以下问题:
(1)若大量亲本黑体雄蛾与浅色体雌蛾杂交,观察到后代有极少的浅色体雄蛾,有不同的假说。假说一:后代少了一条染色体:假说二:发生了基因突变:假说三:_____。
(2)①为验证假说一是否成立,可以取后代浅色体雄蛾具有分裂能力的体细胞,观察处于_____期染色体数目,异常:或者观察后代的浅色体雄蛾_____时期的细胞,四分体的个数为_____个,假说成立。原因可能是亲本黑体雄蛾少数精原细胞在减数分裂发生_____情况,产生某种异常精子与卵细胞结合后,发育为性染色体组成为ZO的后代浅色体雄蛾。
②若假说一不成立,可用荧光标记法将A、a基因分别标记为蓝色、绿色。若后代的浅色体雄蛾初级精母细胞中荧光点数目和颜色为_____,则假说二成立,否则假说三成立。
(3)蚕卵的颜色由10号常染色体上的基因B和b决定,常见颜色为紫灰色和白色。现将两只蚕蛾多次杂交,后代出现的性状分离比为:紫灰色雄性:紫灰色雌性:白色雄性:白色雌性=6:3:2:1.请做出合理的解释_____。
下图为人体体温调节的示意图,请据图回答问题:
(1)受到寒冷刺激时,激素c、d的分泌均会增加,其中产生c的过程属于________调节(填“神经”、“体液”、“神经一体液”),产生d的过程中效应器是________。
(2)激素c和d都能作用于骨骼肌和内脏,通过_________产生热能使体温维持恒定。
(3)寒冷使人面色变白,原因是_________________。
(4)激素e与肾小管、集合管上皮细胞表面受体结合后,经过信息转换,促使细胞内囊泡向细胞膜定向转移,从而提高肾小管和集合管对水的通透性,囊泡膜上很可能含有_________,据此推测,尿液中的水可能以_________的方式被重吸收。
WWP2基因在肿瘤细胞中高度表达,WWP2蛋白参与肿瘤细胞的生长、存活和转移等。为获得较多WWP2蛋白,利用基因工程技术设计引物,其中正向引物5′含有 EcoRI酶切位点,反向引物5′含有XhoI酶切位点。将WWP2基因与相应载体构建重组质粒导入人胚肾细胞。回答下列问题:
(1)利用上述的引物,以肺癌细胞的cDNA为模板,通过___________扩增___________的编码序列,获得需要的目的基因片段。
(2)把获得的目的基因片段和相应载体,都用___________进行酶切,分别在5′端与3′端形成___________,避免自身环化。然后利用___________将目的基因片段和相应载体连接,得到重组质粒。
(3)先将重组质粒导入经___________处理过的大肠杆菌细胞,培养后从中分离得到较多的重组质粒。
(4)培养人胚肾细胞时,先用___________使人胚肾细胞分散成单个细胞,用含有___________的合成培养液培养,并将培养瓶置于体积分数为5%的___________与空气混合气体的培养箱中培养。
(5)将重组质粒导入人胚肾细胞中,48小时后提取蛋白质并检测到WWP2蛋白,说明___________。
(6)致癌因子会损伤肺泡细胞中的___________,使原癌基因和抑癌基因发生突变。研究WWP2蛋白的表达,为肺癌治疗新靶点奠定了基础。