Question

（生物——选修l：生物技术实践）

自1964年印度科学家培养曼陀罗花药获得单倍体植株后，花药离体培养技术发展迅速，据记载，现在已经有250多种高等植物的花药培养成功。

(1)组培中，常采用_____培养基，主要包括的成分有水、大量元素、________、有机物，还需要添加植物激素。

(2)细胞分裂素和生长素的使用顺序和用量会影响到植物细胞的发育方向。如，为了有利于细胞分裂而不分化，两种激素的使用顺序为：__________。花粉植株产生的途径有两种：一种是花粉脱分化形成愈伤组织，另一种是形成___________。

(3)进行月季花药离体培养一般选择在五月初到五月中旬。对于花粉而言，要采用______期的花粉，为了鉴定该时期的花粉，常采用醋酸洋红法进行染色鉴定。若是某些植物花粉细胞不易着色，常采用_______法染色，能将花粉的细胞核染成_______色。

(4)消毒后的花蕾，在无菌条件下除去萼片与花瓣，剥离花药时，尽量不要损伤花药，同时要将__________彻底去除。

Answer

MS固体 微量元素 先生长素，后细胞分裂素 胚状体 单核（单核居中到单核靠边） 焙花青鉻矾法 蓝黑 花丝

【解析】

1、组织培养常用的MS培养基含大量元素、微量元素、有机物，有机物包括甘氨酸、维生素B1、维生素B6、烟酸、肌醇、蔗糖、琼脂等，还需要添加植物生长素、细胞分裂素等植物生长调节物质，微生物培养基不含有植物激素．MS培养基含氨基酸，如甘氨酸，含碳源，如蔗糖，含维生素B1和维生素B6。

2、细胞分裂素和生长素的使用顺序不同，培养的结果不同．先使用生长素，再使用细胞分裂素，有利于细胞分裂，但细胞不分化；先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂又分化；两者同时使用，细胞分化频率提高。

3、在植物组织培养时，通过调节生长素和细胞分裂素的比值能影响愈伤组织分化出根或芽．因此从愈伤组织形成完整植株的途径有两条，具体通过那一条途径主要取决于培养基成分中激素的种类及其浓度配比；由花粉离体培养得到的是植株是单倍体植株，这也说明成熟花粉细胞具有全能性。

4、通常选择植物单核期的花药培养成功率最高．花药取样后通常用醋酸洋红法染成红色镜检，对不易着色的则用焙花青-铬矾法对其染色，颜色是蓝黑色。

（1）植物组织培养常采用的培养基为MS固体培养基；MS固体培养基的组成成分有水、大量元素、微量元素、有机物，还必须添加植物激素（生长素和细胞分裂素）。

（2）先加生长素，后加细胞分裂素可以使细胞分裂而不分化；花药离体培养的途径有两种：一种是花粉脱分化形成愈伤组织，另一种是形成胚状体。

（3）进行花药离体培养时，一般选择单核期（或单核居中期到单核靠边期）的花粉成功率最高；鉴定花粉发育时期时，需要对染色体进行染色，一般采用醋酸洋红法进行染色，对于某些植物的花粉不易着色，可以采用焙花青铬矾法进行染色，可以将细胞核染成蓝黑色。

（4）花药离体培养时，剥离花药时，尽量不要损伤花药，同时要将花丝彻底去除，防止得到正常染色体数目的个体。