Question

为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题

（1）培养微生物的培养基含有的营养成分一般都含有水、无机盐、_______、_____等。此外，还需要满足微生物生长对pH、温度、______及特殊营养物质的需求。

（2）培养基配制时需要进行灭菌，对培养基进行灭菌，采用的方法是_____________。灭菌后，随机取若干灭菌后的平板先行培养一段时间，这样做的目的是________________。

（3）该小组将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为32、39和43，据此可得出每毫升水样中的活菌数为 ________。这种接种方法叫_______________。

（4）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，接种操作时，全程要在___________附近进行。

Answer

碳源 氮源 氧气 高压蒸汽灭菌 检测培养基灭菌是否合格 3.8×104 ； 稀释涂布平板法 酒精灯火焰

【解析】

微生物接种常用的两种方法

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）微生物培养过程中需要的营养物质主要有碳源、氮源、水、无机盐等。 此外，还需要满足微生物生长对pH、温度、氧气、及特殊营养物质的需求。

（2）微生物培养过程应该进行无菌操作，配制的培养基要进行高压蒸汽灭菌，可以将灭菌后的空白平板进行培养以检测培养基灭菌是否彻底。

（3）由题意知1ml水样中的菌落数是（32+39+43）÷3÷0.1×100=3.8×104个。该种计数方法需要使用稀释涂布平板法接种。

（4）对水样进行平板划线法操作时需要进行无菌操作，即全程需要在酒精灯火焰附近操作。