Question

动物被宰杀后，肉中的三磷酸腺苷(ATP)经过降解生成对肉鲜味贡献最大的物质——肌苷酸(IMP)，但是在酸性的磷酸酶(ACP)作用下该物质会进一步降解导致肉鲜味下降、风味变差。为了研究鱼类的保鲜方法，研究者欲研究Na⁺、Zn²⁺、Ca²⁺对从草鱼肌肉中分离纯化得到的ACP活性的影响，实验材料和操作如下（ACP可催化磷酸苯二钠分解生成苯酚，苯酚在碱性条件下与4—AAP缩合，最终生成红色化合物，通过颜色变化可测定酶活性）。

实验材料：柠檬酸缓冲液(pH为5．0)，碳酸盐缓冲液(pH为10．0)，ACP溶液，磷酸苯二钠溶液，不同浓度的Na⁺、Zn²⁺、Ca²⁺溶液，4—AAP溶液等。

操作步骤：
（1）取若干洁净的试管，用蒸馏水清洗以去除自来水中的氯离子，其目的是________________；各反应体系均加入等量的_________缓冲液，其目的是保证各反应体系的pH最适宜且相同。

（2）在实验组试管中加入_____________________________、ACP溶液、磷酸苯二钠溶液，对照组试管加入___________________________________________。

（3）在最适温度下保温一段时间后，加入等量的碳酸盐缓冲液、________测定酶的活性。

（4）若实验得到的一组数据如下表，据表分析，对ACP活力有激活作用的离子是_________，可以通过在鱼肉中添加微量的_________来抑制鱼肉鲜度的降解。

金属离子	浓度（mmol/L）	ACP相对活性
Na^+	30	100．83
Zn^2+	1	112．38
Ca^2+	5	65．21

Answer

排除氯离子对酶活性的影响 柠檬酸 等量的不同浓度的Na+、Zn2+、Ca2+溶液 等量的蒸馏水、ACP溶液、磷酸苯二钠溶液 4-AAP溶液 Zn2+ Ca2+

【解析】

酶的催化具有高效性（酶的催化效率远远高于无机催化剂）、专一性（一种酶只能催化一种或一类化学反应的进行）、需要适宜的温度和pH值（在最适条件下，酶的催化活性是最高的，低温可以抑制酶的活性，随着温度升高，酶的活性可以逐渐恢复，高温、过酸、过碱可以使酶的空间结构发生改变，使酶永久性的失活），据此分析解答。

（1）取若干洁净的试管，用蒸馏水清洗以去除自来水中的氯离子，其目的是排除氯离子对酶活性的影响；根据题干：肉中的三磷酸腺苷(ATP)是在酸性的磷酸酶(ACP)作用下经过降解的，故应在各反应体系均加入等量的柠檬酸缓冲液，其目的是保证各反应体系的pH最适宜且相同。

（2）该实验研究Na+、Zn2+、Ca2+对从草鱼肌肉中分离纯化得到的ACP活性的影响，故自变量是不同浓度的Na+、Zn2+、Ca2+的盐溶液，故在实验组试管中加入等量的不同浓度的Na+、Zn2+、Ca2+溶液、ACP溶液、磷酸苯二钠溶液，对照组试管加入等量的蒸馏水、ACP溶液、磷酸苯二钠溶液。

（3）在最适温度下保温一段时间后，根据题干苯酚在碱性条件下与4—AAP缩合，最终生成红色化合物，通过颜色变化可测定酶活性可知，应加入等量的碳酸盐缓冲液、4-AAP溶液测定酶的活性。

（4）据表分析可知，与Na+相比，Zn2+的一组酶的ACP相对活性提高，推测Zn2+对ACP活力有激活作用；与Na+相比，Ca2+的一组酶的ACP相对活性降低，推测可以通过在鱼肉中添加微量的Ca2+来抑制鱼肉鲜度的降解。