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下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。请回答下面问题: (1)经过HAT培养基选择...

下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。请回答下面问题:

1)经过HAT培养基选择培养的细胞,还需要进一步培养和筛选。筛选过程通常通过“有限稀释法”完成,具体做法是:将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到适宜浓度,再向细胞培养板(如图)的每个孔中滴加适量的稀释液,其概率为每孔内落入一个细胞,从而能达到____________的目的;培养一段时间后取上清液,上清液能与____________结合的培养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞,继续进行有限稀释,重复若干次,直到确信每孔中增殖细胞为单克隆细胞。

2)将所选的细胞在体外条件下进行大规模培养,培养过程中应严格控制无菌无毒的环境。其中,要控制无菌环境应进行的操作有______________________________________________________

3)在培养细胞的过程中,细胞内合成的特异性抗体通过____________方式排出细胞,该过程____________(填“需要”或“不需要”)膜上蛋白质的参与。

4)单克隆抗体用作体外诊断试剂,可以高效准确地进行人类疾病和动植物病害的诊断和病原鉴定。其原理是______________________________

 

单一细胞培养以保证抗体纯度(或克隆化培养) 特定抗原 对培养液和培养用具进行无菌处理 向培养液添加一定量的抗生素 胞吐 不需要 单克隆抗体纯度高、特异性强,能准确识别各种抗原的细微差异,并和特定抗原发生特异性结合 【解析】 将特定的抗原注射小鼠,筛选出产生抗体的淋巴细胞,与骨髓瘤细胞融合,转移到HAT培养基中培养,未融合的细胞死亡,而杂交瘤细胞存活,杂交瘤细胞分开培养,选育出产生高特异性抗体的细胞。 (1)为选育出能产生高特异性抗体的细胞,要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7~10个细胞/ml,每孔滴入0.1ml细胞稀释液,其目的是使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培养的目的(或单一细胞培养以保证抗体的纯度);培养一段时间后取上清液,上清液能与特定抗原合的培养孔为阳性孔。 (2)通过对培养液和培养用具进行无菌处理,控制无菌环境。 (3)特异性抗体化学本质是蛋白质,以胞吐方式排出细胞,胞吐的过程需要消耗能量,但不需要载体蛋白的协助。 (4)单克隆抗体纯度高、特异性强,能准确识别各种抗原的细微差异,并和特定抗原发生特异性结合,所以单克隆抗体用作体外诊断试剂,可以高效准确地进行人类疾病和动植物病害的诊断和病原鉴定。
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考点分析:
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胡萝卜素是常用的食品色素,广泛用作食品、饮料、饲料的添加剂,而且在人体内更可以发挥重要作用,甚至天然胡萝卜素还具有使癌变细胞恢复成正常细胞的作用。图是提取胡萝卜素的实验流程示意图,①④代表相应的操作环节,请据图回答下面问题:

1)图中,②③④依次代表的是__________________

2)四氯化碳、乙酸乙酯、苯和石油醚这些有机溶剂中,最适宜用来提取胡萝卜素的是____________。胡萝卜素萃取时,不选用乙醇或乙醚作萃取剂主要是因为________________________

3)天然β-胡萝卜素价格不菲,因此萃取的效率至关重要。萃取的效率主要取决于____________;结合上图①②过程,我们还知道__________________会影响萃取效率;除此以外,一些其他操作条件也会影响萃取效率。

4)图实验是对提取的胡萝卜素粗品进行的鉴定,图示方法叫做____________法,AD)和BC)处分别加的是________________________

 

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果蝇体细胞有8条染色体,号为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ(每一型号对应一对同源染色体)。果蝇野生型和5种突变型的性状表现控制性状的基因符号和基因所在染色体的编号如下表所示:

类型

性状

①野生型

②白眼型

③黑身型

④残翅型

⑤短肢型

⑥变胸型

染色体

红眼w

灰身B

长翅

正常肢D

后胸正常H

白眼W

 

黑身b

 

 

残翅型v

 

 

 

短肢d

 

 

 

 

后胸变形b

X(Ⅰ)

 

注:1.每种突变型未列出的性状表现与野生型的性状表现相同2.6种果蝇均为纯合体并可作为杂交实验的亲本

请分析并回答下列问题:

1)若要设计实验研究染色体交叉互换对生物性状的影响,并通过观察果蝇体型的遗传表现来完成,应选择的杂交亲本的基因型是______________________________。选择上述亲本进行杂交的理论根据是通过交叉互换过程实现重组的基因只能是位于____________上的____________基因。

2)现选择表现型为____________的果蝇作为亲本进行杂交,再使F1雌雄果蝇相互交配,才能在F2中得到杂合的长翅白眼雌果蝇。杂合的长翅白眼雌果蝇占同一代雌性个体的比例是____________

3)已知果蝇的正常眼(基因为E)和无眼基因为e)是一对相对性状研究发现该性状与上表中的任意一对性状的遗传都遵循基因的自由组合定律,请判断Ee基因位于____________号染色体,判断理由是____________________________________

 

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随着城市化的发展,城市水污染问题日益突出。建立人工湿地公园是解决城市水污染的一种有效途径。请回答有关问题:

1)调查人工湿地公园中鲫鱼的种群密度可以采用___________法。若用样方法调查人工湿地植被的丰富度,需统计每个样方中的_________________

2)将废弃河道改造为人工湿地公园,体现了群落的____________演替。该人工生态群落的建立,说明人类活动往往使群落演替按照不同于自然演替的____________进行。

3)流经该湿地生态系统的总能量包括__________________。人工湿地净化污水时,体现了该湿地生态系统的____________稳定性。人工湿地公园的建立为居民提供了游玩观赏的去处,这体现了生物多样性的____________价值。

 

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为了探究油菜素内酯(BR,一种天然植物激素)对黄瓜生长的调节作用,用BRBrz(植物合成BR的抑制剂)分别处理黄瓜幼苗。实验处理25天后,对植株的生物量和生长参数进行测定,获得以下数据。

BRBrz处理对植物生长参数的影响

 

叶片面积

cm2

茎长

cm

根长

cm

叶绿素

gcm2

CO2同化速率

μmol-cm-2·s-1

气孔导度

mmol·cm-2·s-1

A

1217

77

306

3403

182

258

BR

1701

98

508

3454

231

255

Brz

661

60

257

4023

148

250

 

1)设计该实验时,应该遵循的是____________(填标号),A处的物质为____________

①所选幼苗长势相同        ②每组均用一株幼苗作为材料

③幼苗进行随机分组        ④重复进行实验

⑤在光饱和(或合适)、正常大气CO2浓度下进行实验

2BR通过与植物细胞膜上的____________结合,启动细胞内一系列反应,______植物生理活动,如促进GTP(鸟苷三磷酸)形成cGMP,发挥胞内信使的作用。

3)光反应的产物为____________,结合Brz的数据推测,小郭同学认为“BR主要通过促进光反应提高黄瓜幼苗的光合速率”。请评价这种说法是否合理并说出两条理由: _______________________

4BR影响植物生长还表现在对IAA的影响,野生型植株IAA分布在分生区和伸长区;而BR合成缺陷突变体植株IAA只在分生区有分布。小张同学推测“BR能够促进IAA的极性运输”。请选择合适实验材料、实验操作和实验预期,证明上述假设成立。

aBR基因敲除突变体                bIAA基因敲除突变体

c.野生型                            d.导入含BR基因的表达载体

e.导入含IA基因的表达载体        f.导人空载体

gIAA只在分生区有分布            hIAA分布在分生区和伸长区

对照组步骤组合以及实验预期为______________________________(填标号);

实验组步骤组合以及实验预期为______________________________(填标号)。

 

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光合作用是生物界获得能量、食物和氧气的根本途径。因此,深入探讨光合作用的规律,揭示光合作用的机理,使之更好地为人类服务愈加显得重要和迫切。以下为研究光合作用的相关实验。

Ⅰ.为研究大棚内CO2浓度对某种植物光合作用的影响,在自然种植和人工一次性施加CO2的条件下测得该种植物的光合速率变化曲线如图。

1)由图可知,人工一次性施加CO2最佳时间为____________

217时叶肉细胞内产生ATP部位是__________________

37~8时,____________是限制光合速率的主要环境因素。

Ⅱ.在黑暗条件下,将分离得到的类囊体放在pH=4的缓冲溶液中,使类囊体内外的pH相等,然后迅速转移到含有ADPPipH=8的缓冲溶液中,结果检测到有ATP的生成。根据实验分析推测,光照条件下植物细胞叶绿体中类囊体的腔内H+浓度较______(填“高”或“低”),H通过______方式从类囊体膜内运到膜外。植物叶肉细胞的部分代谢过程如图所示,据图分析,物质A______,物质B______,图示的能量转化过程为光能→____________→活跃的化学能。

 

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