Question

某生物实验小组将酵母菌接种到装有10mL液体培养基的试管中，通气培养并定时取样计数，然后绘制增长曲线。图1是小组成员用血细胞计数板观察到的培养结果（样液稀释10倍，血细胞计数板规格1mm×1mm×0.lmm），图2曲线a、b是两批次酵母菌培养的结果。分析回答问题。

    

（1）取样时应先振荡试管，原因是________。制片时应该在盖盖玻片________（选填“前”“后”）滴加样液。

（2）在计数前常采用台盼蓝染液染色，若细胞被染成蓝色，则_________（选填“需要”“不需要”）计数。计数时若图1双线边内有4个细胞为蓝色，此时试管中酵母菌数量约为________个。

（3）比较图2中时两批次培养的种群增长速率、种内斗争的强度以及时两批培养液中营养物质的剩余量依次是________、________、________（选填“a>b” “a=b”“a<b”）

（4）若在后继续培养，最终发现种群的数量均会下降，可能的原因有____________。

Answer

使酵母菌分布均匀 后 不需要 a>b ab 营养物质过度消耗，有害代谢产物大量积累，PH值不适宜

【解析】

采用抽样检测法使用血球计数板对酵母菌进行计数，在计数时应从以下几方面注意：

1.每天同一时间，各组取出本组的试管，用血球计数板计数酵母菌个数，并作记录，连续观察7天。

2.从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡几下，这样使酵母菌分布均匀，防止酵母凝聚沉淀，提高计数的代表性和准确性，求得的培养液中的酵母菌数量误差小。

3.血细胞计数板计数时，应先放置盖玻片，在盖玻片的边缘滴加培养液，待培养液从边缘处自行渗入计数室，吸去多余培养液，再进行计数。如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当对培养液进行稀释以便于酵母菌的计数。

4.对于压在方格界线上的酵母菌应当计数同侧相邻两边上的菌体数，一般可采取数上线不数下线，数左线不数右线的原则处理，另两边不计数。

5.计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算，对每个样品可计数三次，再取其平均值。计数时应不时地调节焦距，才能观察到不同深度的菌体，按公式计算每mL（或10mL）菌液中所含的酵母菌个数。

（1）根据以上分析可知，吸取培养液前应将培养瓶轻轻振荡，使酵母菌分布均匀，防止酵母凝聚沉淀，提高计数的代表性和准确性。血细胞计数板计数时，应先放置盖玻片，在盖玻片的边缘滴加培养液，待其自行渗入计数室，吸去多余培养液，再进行计数。

（2）由于活细胞具有选择透过性，不会被台盼蓝染液染色，若细胞被染成蓝色，则该酵母菌细胞为死细胞，不需要进行计数，计数时若图1双线边内有4个细胞为蓝色，识图分析可知图中双边线内16个小方格中共有活动酵母菌为20，则此时试管中酵母菌数量约为20÷16×400×10×10×1000÷0.1=5×108个。

（3）识图分析图2可知，曲线a、b均为S型增长曲线，在时两批次培养的种群增长曲线中a正处于K/2时，此时增长速率最大，而b曲线此时种群数量大于K/2，因此其增长速率已经小于K/2时的增长速率，故a＞b，而种内斗争的强度此时a＜b；由图2可知，曲线b达到K值较快，而a曲线达到K值需要的时间较长，即增长过程缓慢，因此b曲线达到K值时剩余的营养物质的量少于a，即营养物质剩余量a＞b。

（4）若在后继续培养，由于受到营养物质的限制，导致营养物质过度消耗，且有害代谢产物会大量积累，PH值不适宜等，最终使得种群的数量均会下降。