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土壤盐渍化影响水稻生长发育。科研人员将水稻耐盐基因OsMYB56导入不耐盐碱水稻...

土壤盐渍化影响水稻生长发育。科研人员将水稻耐盐基因OsMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉粳88中,培育出了4株耐盐碱水稻新品种。其操作流程及相关限制酶识别序列和切割位点如下图,图中I~III为限制酶的酶切位点,bar为抗除草剂基因,Kanr为卡那霉素抗性基因。请回答:

限制酶

EcoRI

BamHI

HindIII

SacI

识别序列和切制位点

G1AATTCG

G1ATCC

A1AGCTT

GAGCT1C

 

 

1)过程①需要________的催化。过程③需要用________处理根瘤农杆菌,使其成为感受态细胞。

2)过程①所用引物如下,则过程②使用的限制酶是_________________

5'CGCGGATCCATGAGAAAGGGCCCGTGG3'

5'CGAGCTCCTATCCCCAGAGAGGTAGCGA3'

3)花椰菜病毒启动子含有________的核苷酸序列,本研究中设计两个相同启动子分别连接bar和目的基因,其目的是________

4)科研人员采用特定的方法大量提取成功转化的4株植株叶片的基因组DNA(目的基因中不含AAGCTT),用HindIII完全消化,消化产物经电泳、转膜后与目的基因的探针杂交,其杂交带结果如图所示(图中数字标号代表转化成功的植株)。下列有关分析正确的有___

①还有不含目的基因的DNA条带在图中没有显示

②杂交带位置不同说明HindIIII消化形成的DNA片段长度不同

③相同位置上杂交带对应DNA片段的脱氧核苷酸序列相同

④目的基因插入到受体细胞核DNA的位置和数量都是随机的

 

Taq酶(耐高温的DNA聚合酶) Ca2+(或CaCl2) BamHI SacI RNA聚合酶识别、结合 依据bar表达推测目的基因同时表达 ①②④ 【解析】 基因工程技术的基本步骤: (1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 (2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 (3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 (4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 (1)过程①属于PCR技术扩展,需要耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)的催化。过程③属于感受态细胞法导入受体细胞,故需要用Ca2+(或CaCl2)处理根瘤农杆菌,使其成为感受态细胞。 (2)观察一对引物5'段会发现BamHI的识别序列GATCC和SacI的识别序列GAGCTC,故过程②使用的限制酶是BamHI和SacI。 (3)启动子又叫RNA聚合酶结合位点,故其含有RNA聚合酶识别、结合的核苷酸序列,本研究中设计两个相同启动子分别连接bar和目的基因,其目的是依据bar表达推测目的基因同时表达。 (4)①消化产物经电泳、转膜后与目的基因的探针杂交,不含目的基因的DNA条带在图中没有显示,①正确; ②杂交带位置不同说明HindIIII消化形成的DNA片段长度不同,②正确; ③相同位置上杂交带对应DNA片段长度相同,脱氧核苷酸序列不一定相同,③错误; ④目的基因插入到受体细胞核DNA的位置和数量都是随机的,所以不同植株的实验结果中杂交带数目不同,④正确。 综上①②④正确,故选①②④。
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考点分析:
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大麦麦芒是由麦叶退化而成,着生在麦穗的侧列和中列,对产量具有重要作用。大麦是否生芒由A(有芒)、a(无芒)和Bb两对等位基因控制,在侧列中基因B的表达产物抑制基因A的表达,在中列中基因B不表达;麦芒芒形由基因D(钩形)、d(直形)控制,如基因型为AABBDD的个体表现为侧列无芒中列钩芒。科研人员利用侧列中列均钩芒、侧列无芒中列直芒两个纯系亲本(如图1)进行杂交实验得到F1F1自交得到F2F2的表现型及比例如图2。请回答:

1)进行人工杂交实验时对大麦母本的操作步骤是:________→套袋→________+套袋。

2)实验中两个纯系亲本的基因型为_____________F1的表现型是________

3)据实验结果,在AaBbDd三对等位基因中可以确定遵循基因的自由组合定律的是________

4F2中,整穗芒形一致的个体占________

5)若要进一步筛选、保留侧列中列均钩芒的纯合子,请设计简便的筛选方案:________

 

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研究人员设计出如图1所示的组合型生态浮床,并开展对受到生活污水污染的池塘水净化的实验,研究中设置了四组实验:组合型生态浮床植物对照组(仅等量美人蕉)、基质对照组(仅等量球形塑料填料)和空白对照组,图2是本实验测得的水体总磷量变化。请回答:

1)实验开始前,浮床所用的球形塑料填料先要进行灭菌处理,再置于待治理的池塘水中,在适宜条件下培养14d(每两天换水一次),直到填料表面形成微生物菌膜。选用池塘水的作用是_________,固定的微生物大多数属于生态系统的_________(成分)。

2)生态浮床上美人蕉旺盛生长的根系有较强的泌氧能力,能为填料表面微生物提供适宜微环境,美人蕉与填料表面微生物之间存在________关系。美人蕉既能净化水体又有观赏价值,这体现了生物多样性的_________价值。

3)图2实验结果说明组合型生态浮床对总磷量去除率较高,主要原因是通过美人蕉和微生物吸收磷并同化为自身的_________等生物大分子,在生态系统中这些磷元素可能的去向有_________。在浮床种植植物的根部增加填料固定微生物,对水体磷去除具有_________作用,有效地提高了水体生态修复效率。

4)在将组合型生态浮床投入池塘进行污水治理过程中,常常会再向池塘中投入一定量的滤食性鱼类(如鲢鱼)和滤食性底栖生物(如河蚌)等,一方面可以完善池塘生态系统的_________,提高生态系统抵抗力稳定性,另一方面通过定期捕获这些生物,降低生态系统总NP含量。

 

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黄芪多糖(APS)具有很好的降血糖作用。为了探究黄芪多糖的降糖机理,科研人员先用高热量饲料饲喂小鼠8周后,用小剂量链脲佐菌素注射小鼠,2周后测定血糖和血清胰岛素含量,筛选获得II型糖尿病模型鼠。利用II型糖尿病模型鼠进行APS降糖实验,主要处理及实验结果如下表(其中GLUT4为葡萄糖转运蛋白)。请回答:

组别

实验动物

处理

5周后实验结果

血糖浓度/mmol·L-1

胰岛素浓度/pmol·L-1

GLUT4相对表达量

1

正常小鼠

灌喂生理盐水

73

84

66

2

糖尿病模型鼠

灌喂生理盐水

162

87

34

3

正常小鼠

灌喂APS溶液

72

86

64

4

糖尿病模型鼠

灌喂APS溶液

103

85

66

 

1)胰岛素可促进组织细胞________,从而实现降血糖功能。

2)在培育II型糖尿病模型鼠的过程中,长时间饲喂高热量饲料,可引起胰岛B细胞代偿性增殖,________增加,最终导致小鼠产生胰岛素抵抗。再给胰岛素抵抗小鼠注射小剂量链脲佐菌素以杀死部分_________,快速获得II型糖尿病模型鼠。请在答题纸相应位置的坐标图中绘制出模型鼠培育过程中小鼠空腹血糖的含量变化。________

3)本实验中,比较第13组实验结果说明________;比较第124组实验结果可知,APS降血糖的机理是________

4)本研究中制造II型糖尿病模型鼠的过程给我们健康生活上的启示是________

 

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为了培育高效利用木糖发酵产乳酸的菌株,科研人员将能利用木糖产乳酸的菌种搭载于中国“实践八号”育种卫星,卫星返回后进行筛选,其主要流程如下图,其中乳酸能溶解培养基中的碳酸钙形成透明圈。请回答:

1)与步骤②相比,步骤③的培养基成分还含有_____________。两培养基均以木糖作为唯一碳源的目的是________

2)步骤③中,应在________附近倒平板,不采用涂布接种的原因是_________。平板在适宜条件下培养一段时间后,筛选有透明圈的菌落作为候选菌。

3)科研人员从候选菌中初步筛选出产乳酸能力较强的四种菌株,再通过连续转接和液体发酵进行遗传稳定性检测,得到下表所示结果(单位:g·L-1),最终确定卫10为最优菌株,依据是________

传代次数

菌株

10

32

56

69

2

7078

7123

7052

6924

5

7023

6952

6746

6565

8

6958

6216

6052

6153

11

7075

5569

5242

5572

14

6942

4228

4022

4438

 

4)若要进一步探究卫10发酵的最适木糖浓度,试写出实验思路:________

 

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2019年诺贝尔生理学或医学奖授予三位科学家以表彰他们在分子机理上发现细胞如何适应氧气供给变化。研究发现肾皮质间质细胞能持续合成低氧诱导因子(HIF),氧气供应正常时HIF被降解,氧气供应不足时HIF在细胞内积累,促进促红细胞生成素的生成,相关机理如图所示。请回答:

1)有氧呼吸时氧气在肾皮质间质细胞中的_______(结构)中被利用,作用是________

2)图中催化过程⑤的酶是___________,过程⑥除了图示物质和结构外还需要的条件是________

3)平原地区的人进入高原地区后,会加快________(填序号)过程,其意义是________

4)兴奋剂rHuEPU(重组人促红细胞生成素)与人体内源促红细胞生成素极为相似。rHuEPO皮下注射后1~3天可被机体清除,其作用的效果可维持4周。世界反兴奋剂中心(WADA)通常通过检测_________含量来判断是否使用该兴奋剂。

 

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