Question

养蚕、缫丝、织绸等蚕业在我国已有四千多年的历史。在蚕丝加工过程中，需要将蚕丝中的丝胶（化学成分主要为蛋白质）从丝纤维上分离下来，用酶进行蚕丝脱胶成本低、效率高且污染少。回答相关问题：

（1）蚕丝脱胶酶只分解丝胶不分解丝纤维，表明丝纤维蛋白与丝胶蛋白在结构上有________（填“少许”或“明显”）区别。为了获得能产生用于蚕丝脱胶且对丝纤维损伤小的蛋白酶的微生物单菌落，可从丝厂周边土壤中取样，并应选用以________为碳源的_______培养基进行培养。

（2）若要测定培养液中微生物的菌体数，可在显微镜下用_______________直接计数；若要测定其活菌数量，可选用___________________法进行计数。

（3）酶脱胶在_____________温下进行，菌株产酶能力及酶活力还受初始发酵pH影响。为了确定获得产酶发酵最适初始pH，某同学测得相同时间内，在pH值为7、10、12时降解10g蚕丝粗品的脱胶活力相对值依次为7、10．5、5、9．8。为了进一步确定所选菌株发酵产酶的最适初始pH，接下来的实验思路是：_____________________________________________。

（4）所获得的菌种需要长期保藏，可以采用_________________的方法，通常需要在________________________中保存。

Answer

明显 蛋白质 固体 血细胞计数板 稀释涂布平板 常 应围绕pH值10设计系列梯度pH，在相同时间内，测得各pH下降解一定量蚕丝粗品丝胶的脱胶活力相对值，最大脱胶活力相对值时的初始pH即为最适初始pH 甘油管藏 冷冻冰箱

【解析】

酶具有专一性的特性，蛋白质的空间结构不同形式的功能也有差别，因此不同的蛋白质可能需要不同的酶分析。微生物的计数可以使用显微镜观察法直接观察细胞的个数，也可以使用稀释涂布平板法间接计算微生物的数量。

（1）丝纤维蛋白与丝胶蛋白在结构上有明显的差异使得酶不能识别从而不能催化分解；由于生产生需要对蚕丝脱胶且对丝纤维损伤小，因此想要使用酶分解丝胶蛋白，所以应该使用以蛋白质为唯一碳源的固体培养基做选择培养；

（2）微生物的直接计数方法为显微镜计数法，间接计数的方法为稀释涂布平板法，一般稀释涂布平板法可以对活菌进行计数；

（3）酶具有反应条件温和的特点，作用温度要求常温；该题中所研究的PH数据中，在pH为10时具有较强的分解能力，因此可以设计实验围绕pH值10设计系列梯度pH，在相同时间内，测得各pH下降解一定量蚕丝粗品丝胶的脱胶活力相对值，最大脱胶活力相对值时的初始pH即为最适初始pH；

（4）菌种的保藏中长期保藏需要使用甘油管藏，需要温度为零下4摄氏度，因此在冷冻冰箱保存。