Question

根据“利用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养”实验。请回答。

（1）利用牛肉膏蛋白胨固体培养基培养大肠杆菌时，牛肉膏可以提供_______、______、磷酸盐和维生素等营养物质。配制培养基时，各种成分在熔化后分装前必须进行______。

（2）获得纯净的培养物的关键是______。倒平板的时候将锥形瓶的瓶口通过火焰目的是______。

（3）如图采用的接种方法是______，在2、3、4、5区域内划线接种，总是从上一次划线的末端开始划线是因为线条末端细菌的数目比线条起始处要______，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终得到________，划线结束后灼烧接种环的目的是______。接种后培养基平板应______于37°C恒温箱中培养。

Answer

碳源 氮源 调节pH 防止外来杂菌入侵 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基 平板划线法 少 由单个细菌繁殖而来的菌落 及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者 倒置

【解析】

1、用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养，可分为制备培养基和纯化大肠杆菌两个阶段进行，其中制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板；微生物接种的核心是防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。

2、微生物的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。

（1）牛肉膏是有机物累物质，所以可以提供碳源、氮源磷酸盐和维生素等营养物质，各种成分在熔化后分装前必须进行调节pH。

（2）获得纯净的培养物的关键是防止外来杂菌入侵，倒平板的时候将锥形瓶的瓶口通过火焰目的是通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。

（3）图中采用的接种方法是平板划线法，平板划线法分离细菌过程中，由于线条末端细菌的数目比线条起始处要少，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个细菌繁殖而来的菌落。划线结束后灼烧接种环的目的是及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者，接种后培养基平板应倒置于37°C恒温箱中培养。