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一种新型融合蛋白蜂毒素一SP94,具有较好的靶向性和毒素活性,为肝癌的靶向性治疗...

一种新型融合蛋白蜂毒素一SP94,具有较好的靶向性和毒素活性,为肝癌的靶向性治疗提供了新的思路。它是将蜂毒素与SP94组合序列优化改造成熟,再转换成序列长度为150bpDNA序列并与pET32a质粒构建表达载体,流程如下图。在大肠杆菌中,重组质粒能表达出新型融合蛋白蜂毒素一SP94。请回答。

pET32a蜂毒素SP94表达载体构建流程图

1)根据蜂毒素和SP94成熟肽的________序列,先将该序列转换成________,再通过逆转录得到________片段。要获得大量的该片段可以通过_____技术进行扩增。

2)将目的基因片段和质粒用限制酶_________进行双酶切,回收目的基因片段与质粒的片段,用___________连接,得到含有目的基因的重组质粒,转入经_________处理过的大肠杆菌细胞培养。

3)为了鉴别受体细胞中是否导入质粒,可用含_____的培养基进行筛选。从筛选出的大肠杆菌中,获取质粒并对其进行酶切鉴定,双酶切后,若测到长度为_________DNA片段,就说明该大肠杆菌中的质粒含有目的基因。

 

氨基酸 mRNA Mel-Sp94(蜂毒素-SP94)基因 PCR KpnⅠ和XhoⅠ DNA连接酶 Ca2+处理过 氨苄青霉素 150bp 【解析】 基因工程的基本操作程序 1、目的基因的获取:原核基因采取直接分离获得;真核基因是人工合成,人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法;PCR技术扩增目的基因。 2、基因表达载体的构建 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测和表达 (1)从图中看出,目的基因的获取是通过人工合成,成熟肽的基本组成单位是氨基酸,所以可以根据其氨基酸序列转换成mRNA序列,通过你转款获得DNA片段(Mel-Sp94(蜂毒素-SP94)基因)。要获得Mel-Sp94(蜂毒素-SP94)基因可以通过PCR技术进行扩增。 (2)比较重组质粒和正常质粒的结构,可以分析出用限制酶KpnⅠ和XhoⅠ切割的目的基因片段和质粒,形成相同的黏性末端,在用DNA连接酶进行连接,转入大肠杆菌之前需要用Ca2+处理受体细胞。 (3)该质粒上有氨苄青霉素作为标记基因,所以可以在含有氨苄青霉素的培养基上进行筛选。从题干中看出目的基因的序列有150bp。
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考点分析:
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根据利用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养实验。请回答。

1)利用牛肉膏蛋白胨固体培养基培养大肠杆菌时,牛肉膏可以提供_____________、磷酸盐和维生素等营养物质。配制培养基时,各种成分在熔化后分装前必须进行______

2)获得纯净的培养物的关键是______。倒平板的时候将锥形瓶的瓶口通过火焰目的是______

3)如图采用的接种方法是______,在2345区域内划线接种,总是从上一次划线的末端开始划线是因为线条末端细菌的数目比线条起始处要______,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终得到________,划线结束后灼烧接种环的目的是______。接种后培养基平板应______37°C恒温箱中培养。

 

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某科研小组开展了不同浓度的a一萘乙酸溶液对水培瓜栗(又称发财树)根系生长的实验探究,结果如下表。请回答。

a一萘乙酸溶液浓度(单位:mg/L

0

50

100

200

300

根数(单位:条)

963

1170

1833

1578

933

平均根长(单位:cm

1352

1549

1724

1593

753

 

1a一萘乙酸是人工合成的对植物的生长发育有_______作用的化学物质,称为__________

2)本实验中设置的对照组a一萘乙酸溶液浓度为_______mg/L,据表分析a一萘乙酸的作用表现出两重性,判断的依据是_______

3)若在此基础上进一步探究a一萘乙酸溶液促进水培瓜栗生根的最适浓度,实验思路是:______

4)在农业生产中,a一萘乙酸可作为除草剂,能除去单子叶农作物中混生的双子叶杂草,出现该结果的原因是______

 

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条件相当的甲、乙两地在山林大火过后,人们在甲地进行了复植,而乙地被废弃,三年后对甲、乙两地调查统计结果是:甲地植被覆盖率为90%,小型土壤动物有56种,个体数有470个,乙地植被覆盖率为30%,小型土壤动物为13种,个体数为107个。请回答。

1)甲地人类的复植过程可改善环境,加速______进程。

2)调查土壤中的小动物,可用______法进行调查。用诱虫器收集小动物时,可根据土壤动物的______________的特性来收集。统计土壤小动物的方法有目测估计法和______,其中目测估计法是按预先确定的________等级来估计单位面积上个体数量的多少。

3)乙地经过漫长的演替发展为森林,在演替过程中,群落的丰富度______。不同阶段群落中的植物种群不同,主要是因为对______、水分、土壤中的矿质元素等环境资源的需求不同。

4)在对赤腹松鼠的调查中,调查范围为100公顷的山林,第一次捕获并标记30只,第二次捕获35只,其中有标记的15只。甲地赤腹松鼠的种群密度是_______

 

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人类性别主要由性染色体差异决定,X染色体的检测广泛应用于性染色体异常的诊断中。

1)研究发现,XXY型患者多余的X染色体为父系来源的约占病例的60%,原因是在减数第一次分裂过程中,同源染色体XY不分离所致。母系来源的约占病例的40%,原因是_______

2)正常女性体内有两条X染色体,在细胞分裂间期,一般情况下,一条X染色体星松散状态,另一条X染色体高度浓缩,折叠紧密,称为巴氏小体。理论上XXY患者的X染色体比正常男性多一条,但两者X染色体上的基因表达量却基本相同,原因是______

3)分析下表可知,巴氏小体(m)与X染色体(n)的数量关系为______,则XXY型患者体内细胞能观察到的巴氏小体数目为_____个。临床上,医生会取孕妇羊水中______进行产前诊断,通过观察巴氏小体的数量,确认胎儿________和性染色体异常情况。

部分性染色体数目异常患者和正常个体的核型及其巴氏小体数目

核型

44+XY

44+XYY

44+XXYY

44+XXXY

44+XXXYY

44+X

44+XX

44+XXX

巴氏小体数目

0

1

2

0

1

2

 

 

 

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波萝叶片的气孔会在夜间开放,有利于大气中CO2的进入,经过一系列反应生成苹果酸,大量储存在液泡中;白天叶片气孔关闭,液泡中积累的草果酸发生转移,在相关酶的作用下转变为CO2和物质ACO2进入叶绿体参与卡尔文循环,物质A则进入线粒体和水彻底分解成CO2[H],请据图回答。

1)物质A______,物质B______,物质C______

2)夜间菠萝叶肉细胞吸收CO2,却不进行光合作用,是因为缺少光反应提供的_______,白天气孔关闭,光合作用仍能进行的原因是______

3)从气孔开闭角度分析,菠萝更能适应干旱环境是因为白天______

4)菠萝成熟后果实容易腐烂,为销往外地,应在青熟期采收,后用_______浸泡催熟。在运输过程中要保持空气流通,以避免菠萝进行______产生其他有机物,影响口感。

 

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