Question

图为利用生物技术获得生物新品种的过程示意图。据图回答：

（1）随着科技发展，获取目的基因的方法也越来越多，若乙图中的“抗虫基因”是利用甲图中的方法获取的，该方法称为___________。图中①过程与细胞中DNA复制过程相比，该过程不需要___________酶，③是在____(填“酶的名称”)作用下进行延伸的。

（2）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kanR)常作为_____基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。乙图为获得抗虫棉技术的流程。A过程需要的酶有__、____。图中将目的基因导入植物受体细胞采用的方法是_____。

（3）检测目的基因是否转录出mRNA的具体方法是使用标记的______与提取出的____做分子杂交。

Answer

PCR扩增技术 解旋酶 Taq酶 标记 限制酶 连接酶 农杆菌转化法 目的基因 mRNA

【解析】

基因工程的操作步骤：

1、获得目的基因（目的基因的获取）

①从自然界中己有的物种中分离出来，如可从基因文库中获取。
②用人工的方法合成。
获得原核细胞的目的基因可采取直接分离，获取真核细胞的目的基因一般人工合成。

人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。

③利用PCR技术扩增目的基因
PCR的含义：是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。

原理：DNA双链复制

2、制备重组DNA分子（基因表达载体的构建）

①重组DNA分子的组成：除了目的基因外，还必须有标记基因。

②方法：同种限制酶分别切割载体和目的基因，再用DNA连接酶把两者连接。

3、转化受体细胞（将目的基因导入受体细胞）
①转化的概念：是且的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和衣达的过程。 ②常用的转化方法：

将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌介导转化技术(农杆菌转化法)，其次还有基因枪法和花粉管通道技术(花粉管通道法)。

将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。此方法的受休细胞多为受精卵；将目的基因导入微生物细胞： Ca2+处理法。
4、目的基因的检测与鉴定
①首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。

②其次还要检测目的基因是否转录出mRNA，方法是采用分子杂交技术。

③最后检测目的基因是翻译成蛋白质，方法是采用抗原一抗体杂交技术。

④进行个休生物学鉴定。

图甲是PCR扩增技术，图中①表示高温变性；②表示低温复性；③表示中温延伸。图乙为抗虫棉的培育过程，A表示基因表达载体的构建；B对含有目的基因的土壤农杆菌进行选择培养；C表示脱分化过程；D表示再分化；E表示目的基因的检测与鉴定。

（1）乙图中的“抗虫基因”是利用甲图中的PCR扩增技术获取的。图中①过程与细胞中DNA复制过程相比，该过程不需要解旋酶，而是通过加热的方法让氢键断裂的，③是在耐高温的DNA聚合酶即Taq酶的作用下进行延伸的。

（2）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因常作为标记基因，利用该基因控制的性状进行筛选，即只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。乙图为获得抗虫棉技术的流程。A过程为基因表达载体的构建，该过程需要的酶有限制酶和DNA连接酶。图中采用了农杆菌转化法将目的基因导入植物受体细胞。

（3）检测目的基因是否转录出mRNA的具体方法是使用标记的目的基因与从转基因生物中提取出的mRNA做分子杂交。