Question

三孢布拉霉菌能用来生产胡萝卜素，但该菌株的高产性状容易退化，需要定期筛选出高产菌株，研究表明菌体细胞内含有可将无色的TTC还原为红色复合物的物质，且菌体细胞内该物质的含量越高，还原能力越强，胡萝卜素合成能力也越强。结合下列筛选菌株及提取胡萝卜素的流程图回答问题：

三孢布拉霉菌→梯度稀释→涂布到含TTC的培养基上→挑取单菌落→扩大培养→收集菌丝并处理→萃取→鉴定

（1）上述流程图中提取到胡萝卜素后进行鉴定一般要用________法。胡萝卜素能够治疗夜盲症、干皮症等是因为夜盲症、干皮症等疾病是由于缺少维生素A而引起的，而1分子的β-胡萝卜素可被氧化分解成2分子_____________。根据胡萝卜素的理化性质分析，为了让胡萝卜素更容易被人体吸收，炒胡萝卜时要多加些___________。

（2）流程图中将菌液涂布到含TTC的培养基上，目的是筛选出合成胡萝卜素较强的菌体(高产菌株），含TTC的培养基属于__________(填“选择”或“鉴别”)培养基。如何判断培养基是否被污染，请简要回答：________________。挑取单菌落时，若菌落周围____________，则菌株合成胡萝卜素的能力较强。

（3）为了验证萃取物是否是胡萝卜素，该同学将叶绿素 b、叶绿素 a、叶黄素、萃取物和色素混合液(含叶绿素 b、叶绿素 a、叶黄素和胡萝卜素）依次点样在滤纸的 1、2、3、4、5 位置（如图甲所示），并进行分离，滤纸条上各色素带的位置为____________(填字母)时，即可说明该萃取物最可能是胡萝卜素。

Answer

纸层析 维生素 A 油 鉴别 将未接种（或接种无菌水）的培养基放入相同环境中培养 红色圈较深(或红色圈较大） B

【解析】

本题考查微生物的培养、分离与植物有效成分的提取，考查对培养基种类、胡萝卜素提取、鉴定方法的理解和信息的提取能力，解答此题，可根据合成胡萝卜素较强的菌体代谢特点判断选择高产菌株的方法，根据四种色素层析后在滤纸条上的位置判断萃取物的层析结果。

（1）提取到胡萝卜素后可用纸层析法对提取液进行层析，并与标准样液进行比对，胡萝卜素能够治疗夜盲症、干皮症等，夜盲症、干皮症等疾病是由于缺少维生素A而引起的，据此推测β-胡萝卜素可转化为维生素A。胡萝卜素不溶于水，易溶于油脂，为让胡萝卜素更容易被人体吸收，炒胡萝卜时应多加些油。

（2）合成胡萝卜素较强的菌体含有较多的可将无色的TTC还原为红色复合物的物质，将菌液涂布到含TTC的培养基上，可根据菌落周围的颜色筛选出该菌体，若菌落周围红色圈较深(或红色圈较大），则菌株合成胡萝卜素的能力较强。含TTC的培养基属于鉴别培养基。判断培养基是否被污染，可将未接种（或接种无菌水）的培养基放入相同环境中培养，观察是否有菌落出现。

（3）层析后各色素在滤纸条上的位置与其在层析液中的溶解度大小有关，溶解度越大，位置越接近滤纸条顶端，从上到下四种色素分别为胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b，据此可知滤纸条上各色素带的位置为B时，说明该萃取物最可能是胡萝卜素。