Question

如图所示为血红蛋白提取和分离的部分装置，回答下列问题。

（1）在进行样品处理时首先要对红细胞进行洗涤，目的是_______________。红细胞破碎后，通过_________________法将血红蛋白从混合液中分离出来，图甲所示为分离结果。若红细胞洗涤次数过少，则图甲结果可能会_____________。

（2）图乙装置可用于_________过程。现有一定量的血红蛋白溶液，进行上述操作时若要尽快达到理想的实验效果，可以_____________________（写出一种方法）。

（3）通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。凝胶色谱法是根据_________________分离蛋白质的方法。加人SDS可以使蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率完全取决于_________________。

Answer

去除杂蛋白（血浆蛋白），以利于后续步骤的分离纯化 低速短时间离心 分层不明显 透析（粗分离） 增加缓冲液的量（或及时更换缓冲液） 相对分子质量大小 分子的大小

【解析】

血红蛋白的提取和分离流程为：红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分离血红蛋白溶液→透析→凝胶色谱柱的制作→凝胶色谱柱的装填→样品的加入和洗脱。

（1）洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白（血浆蛋白），以利于后续步骤的分离纯化。红细胞破碎后可以采用低速短时间离心的方法将血红蛋白从混合液中分离出来。若红细胞洗涤次数过少，血浆蛋白可能未被除净，导致离心分层时各种成分分层不明显。

（2）图乙装置可用于透析过程，若要尽快达到理想的实验效果，则可采用增加缓冲液的量或及时更换缓冲液的方法。

（3）①凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的方法。②加入SDS可以使蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率完全取决于分子的大小。