Question

大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下图14为培育转基因水稻过程示意图。

1.图中①表示基因工程中的步骤是_________，该步骤需要的工具酶有_________。

2.为了筛检成功导入重组质粒的农杆菌，1号培养基需要加入_______________。诱导组织细胞失去分化的培养基是________。

A．1号培养基             B．2号培养基         C．3号培养基           D．4号培养基

3.让农杆菌侵入愈伤组织而非水稻胚与幼苗。其主要原因有          。

A.胚与幼苗中导入重组质粒的细胞较难发育成完整转基因植株

B.愈伤组织细胞膜因为损伤较多而有利于接受重组质粒

C.3号培养基的作用主要是促进愈伤组织的细胞接受重组质粒

D.转基因水稻植株须由转基因细胞分裂与分化而形成

4.图中⑤至⑥的过程，属于_________________技术。

下图为质粒、含目的基因的DNA及其有关限制酶的作用位点。

5.为提高实验的效能，应采用限制酶_______处理Ti质粒和含目的基因的DNA。

Answer

1. 质粒与目的基因的重组 限制酶和DNA连接酶

2. 1号培养基需要加入潮霉素 B

3.AD

4.组织培养

5.BamHI 和 HindIII

【解析】

1.图中①表示质粒与目的基因的重组，通常要用同一种限制酶分别切割质粒和含目的基因的DNA片段，使它们产生相同的黏性末端，然后再用DNA连接酶连接成重组质粒。

2.质粒上的标记基因为潮霉素抗性基因，所以需要在1号培养基中加入潮霉素；

水稻细胞经过脱分化后可形成愈伤组织失去分化，2号是诱导愈伤组织形成的培养基。

故选B。

3.让农杆菌侵入愈伤组织而非水稻胚与幼苗，其主要原因是胚与幼苗有一定的分化程度。导入重组质粒的细胞较难发育成完整转基因植株；而愈伤组织没有分化，形成转基因细胞后则可通过分裂和再分化形成转基因植株。

故选AD。

4.⑤至⑥的过程，是将已分化的细胞培养成植株，属于组织培养技术。

5.由于EcoRⅠ会破坏目的基因，故应采用限制酶BamHI和HindIII处理Ti质粒和含目的基因的DNA，以防止自身环化，同时形成相同的黏性末端。