Question

请回答下列与基因工程有关的问题。

（1）在基因工程中，获取目的基因主要有两大途径，即____________和从____________中分离。

（2）基因工程的核心步骤是构建基因表达载体，构建基因表达载体需要用的工具酶是____________。在已经构建的基因表达载体中，调控目的基因表达的序列有____________；用于对目的基因进行筛选的序列为_____________。

（3）在获得目的基因后，可以采用PCR技术扩增目的基因，该技术的前提是____________，以便根据这一序列合成引物。PCR技术中所利用的关键酶是____________。

（4）尼伦伯格、马太破译了编码氨基酸的第一个遗传密码，如果说他们的工作为基因的分离和合成提供了启示，那么这一启示是_____________。

Answer

人工合成 自然界已有的物种 限制酶和DNA连接酶 启动子和终止子 标记基因 要有一段已知目的基因的核苷酸序列 热稳定DNA聚合酶（Taq酶） 自然界中从微生物到人类共用一套密码子

【解析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）目的基因的获取方法主要是人工合成和从基因文库中获取即从自然界已有的物种中分离。

（2）基因工程的核心步骤是构建基因表达载体，其中用到的工具酶是限制酶剪切DNA片段，DNA连接酶链接DNA片段；基因表达载体上包含的元件有复制原点、目的基因、启动子、终止子和标记基因等，其中调控目的基因表达的序列有启动子和终止子，对目的基因进行筛选的序列是标记基因。

（3）PCR技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列；其中用到的关键酶是热稳定DNA聚合酶。

（4）尼伦伯格、马太破译了编码氨基酸的第一个遗传密码，他们的工作为基因的分离和合成提供的启示是自然界中从微生物到人类共用一套密码子。