Question

下列有关基因工程相关工具的叙述，正确的是

A. DNA连接酶能将目的基因与质粒黏性末端的碱基随机黏合

B. 限制酶将一个线形DNA分子切成两个片段需破坏两个磷酸二酯键

C. 没有与目的基因重组的质粒也可以进入受体细胞

D. 使用质粒载体可以避免目的基因在受体内被分解

Answer

BCD

【解析】

1、关于限制酶，考生可以从以下几方面把握： 
（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。 
（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。 
（3）结果：形成黏性末端或平末端。 
注意：用限制酶切割DNA时，每切开一个切口需要水解两个磷酸二酯键。 
2、DNA连接酶： 
（1）根据酶的来源不同分为两类：E．coliDNA连接酶、T4DNA连接酶。这二者都能连接成黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低。 
（2）DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 
3、限制酶切割一个识别位点将断裂两个磷酸二酯键，因此限制酶切割质粒时断裂两个磷酸二酯键，形成两个黏性末端；而限制酶切割目的基因时，将断裂四个磷酸二酯键，形成四个黏性末端。 
4、在基因工程，为了防止质粒和目的基因的自身环化，常使用不同的限制酶切割目的基因和质粒；并且不同的限制酶切割形成的黏性末端的碱基序列可能是相同的，因此它们也能发生重组。

DNA连接酶能将目的基因与质粒黏性末端的两脱氧核苷酸之间通过形成新的磷酸二酯键连接起来，A错误；根据分析可知，限制酶将一个线形DNA分子切成两个片段需要切开一个切口，即破坏两个磷酸二酯键，B正确；质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子，质粒与目的基因没有成功重组也可以被导入受体细胞，C正确；使用质粒运载体是为了将目的基因导入受体细胞，避免目的基因被分解，D正确。

故选BCD。