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苯丙酮尿症是由P基因突变引起的,科研人员将正常P基因定点整合到P基因突变的小鼠胚...

苯丙酮尿症是由P基因突变引起的,科研人员将正常P基因定点整合到P基因突变的小鼠胚胎于细胞的染色体DNA上,替换掉突变基因,治愈了老鼠的苯丙酮尿症(如图)。该技术有望在人类疾病的治疗上取得预期效果。请回答下列问题:

1)构建含P基因的重组载体时,常用的工具酶是____;已知含neo‘的细胞具有G418(一种抗生素)的抗性,可见重组载体中的neor ____

2)常用____法将重组载体导入小鼠胚胎干细胞,将重组载体导入胚胎干细胞的原因是胚胎干细胞能大量增殖,且____

3)若从小鼠的早期胚胎中获取胚胎干细胞,可以从 ___中获取;要使贴壁生长的胚胎干细胞从瓶壁上脱落,可用____酶处理。

4)利用neor等筛选出胚胎干细胞,将筛选出的胚胎干细胞培育成小鼠,还需通过检测小鼠体内 ___的含量,进行个体生物学水平的检测。

 

限制酶和DNA连接酶 标记基因 显微注射 具有发育的全能性 桑椹胚或囊胚的内细胞团 胰蛋白酶或胶原蛋白 苯丙酮酸 【解析】 基因工程技术的基本步骤: (1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 (2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 (3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样,将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 (4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术,个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 (1)构建含P基因的重组载体时,常用的工具酶是限制酶和DNA连接酶;含neor的细胞具有G418的抗性,推测重组载体中的neor是标记基因,利于目的基因的检测与鉴定。 (2)将目的基因导入动物细胞,常用显微注射法。胚胎干细胞能大量增殖,且具有发育的全能性,转基因的胚胎干细胞可培育成转基因的新个体。 (3)胚胎干细胞可以从原始性腺或早期胚胎中获取,桑椹胚或囊胚的内细胞团细胞都具有发育的全能性,属于胚胎干细胞。要使贴壁生长的胚胎干细胞从瓶壁上脱落,可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。 (4)对转基因小鼠进行个体生物学水平的检测时,可以通过检测小鼠体内苯丙酮酸的含量来完成。
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通过对枯草芽孢杆菌液体发酵所产生的蛋白酶活力的研究,从来源不同的10株枯草芽孢杆菌样品中筛选出1株蛋白酶活力相对较优的菌株。请回答下列问题:

1)筛选枯草芽孢杆菌时,用无菌水将样品制成溶液并进行梯度稀释,要进行梯度稀释的理由是__________

2)筛选高蛋白酶活力的菌株所用的培养基中应包括 ___、葡萄糖、蛋白质等营养物质,生长因子以及___等;该固体培养基中因含有高浓度蛋白质而不透明,挑选蛋白酶活力相对较优的菌株的依据是 _________________

3)若要在-20℃条件下长期保存筛选出的优良枯草芽孢杆菌,则菌液中常需要加入一定量的____(填“蒸馏水”“甘油”或“蛋白质”)。

4)蛋白酶的活力可用_________ 来表示。

5)利用枯草芽孢杆菌进行液体发酵时,常用摇床进行振荡培养,据此推测枯草芽孢杆菌的细胞呼吸类型是  ___________________

 

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某种苹果成熟果实果皮红色(A)对绿色(a)为显性,独立遗传的基因B只对基因型为Aa的个体有一定抑制作用使其果皮呈粉色。请回答下列问题:

1)基因型为AaBb的植株自交,子一代果皮的表现型及比例为____,子代中自交不发生性状分离的个体占____

2)现有自交不发生性状分离的红果皮植株和绿果皮植株若干,请完成下列鉴别其基因型的实验 任选一株红果皮植株与绿果皮植株杂交,检测子代成熟果实颜色类型及比例。

①若子一代植株所结果实成熟时全部为红果皮,则亲代中红果皮植株与绿果皮植株的基因型分别为______

②若 ___,则亲代中红果皮植株与绿果皮植株的基因型分别为AABbaaBb

③若子一代植株所结果实成熟时全部为粉果皮,让子一代植株再自交,子二代植株所结果实成熟时,红果皮:粉果皮:绿果皮=121,则 ____

3)一株基因型为AaBb的植株出现结绿皮果实的枝条,绿果皮果实出现的原因可能是____(选填:基因突变、基因重组、染色体变异)。

 

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生长素是最早被发现的植物激素;1931年,科学家首先从人尿中分离出具有生长素效应的物质,现已证实,人尿中分离出的具有生长素效应的物质就是生长素。请回答下列问题:

1)生长素在高等植物幼嫩的芽、叶和 ___等部位合成。在这些部位,____(一种氨基酸)经过一系列反应可转变成生长素。

2 NAA(一种生长素类似物)的生理作用具有两重性,下列实验结果能否验证这一结论?请说明理由:_________

3)人尿中生长素从何而来?请提出两个合理解释:____

 

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请回答下列有关物质检测的问题:

1)向适宜浓度的蔗糖溶液中加入斐林试剂,水浴加热后溶液呈____色。

2)现有失去标签的03 g/mL的蔗糖溶液、3%的淀粉溶液和2%的淀粉酶(最适温度55℃左右l溶液,请用现配的斐林试剂、水浴加热装置、试管、温度计等将它们鉴别出来。请简述鉴定步骤: _________

 

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研究表明,油菜角果发育过程中,首先是角果皮发育,然后才是种子的肥大和充实。油菜角果皮细胞能进行光合作用,在角果皮发育期,大部分必需的营养物质是由其他器官转运而来的,现要探究种子肥大、充实期所需有机物的主要来源。请回答下列问题:

1)同一角果皮细胞中,线粒体产生的CO2至少穿过____层生物膜才能被C5固定形成C3;发育过程中,随着角果皮逐渐由绿变黄,其光合速率显著降低,原因是 ____

2)油菜种子肥大、充实期,蛋白质含量基本不变,淀粉和可溶性糖含量不断下降至很低,而脂肪含量则逐渐增加至超过干重的一半,说明  ___

3)以14 CO2为原料,设计实验探究种子肥大、充实期所需的有机物主要来源是不是角果自身的光合作用。请写出实验思路: ____

 

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