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某校一个生物活动小组要进行研究性学习,对生物学史上的经典实验进行验证,也是研究性...

某校一个生物活动小组要进行研究性学习,对生物学史上的经典实验进行验证,也是研究性学习的内容之一。这个小组借助某大学的实验设备,对有关DNA复制的方式进行探究,有人认为DNA是全保留复制,也有人认为DNA是半保留复制。为了证明这两种假设,这个小组设计了下列实验程序,请完成实验并对结果进行预测。

1)实验步骤

第一步:在氮源为14N的培养基上生长的大肠杆菌,其DNA均为14NDNA;在氮源为15N的培养基上生长的大肠杆菌,其DNA均为15N-DNA。用离心方法分离得到的结果如图所示,其DNA分别分布在轻带和重带上。

第二步:将亲代大肠杆菌(含15N)转移到含14N的培养基上繁殖一代(I),同样离心,请

如果DNA分布情况为_______________________________,则是全保留复制;如果DNA分布情况为_____,则是半保留复制。

第三步:为了进一步验证第二步的推测结果,将亲代大肠杆菌(含15N)转移到含14N的培养基上连续繁殖两代(Ⅱ),同样离心,请

如果DNA分布情况为____________________,则是全保留复制;如果DNA分布情况为____________,则是半保留复制。

2)有人提出:第一代(I)的DNA用解旋酶处理后离心,就能直接判断DNA的复制方式。如果轻带和重带各占1/2,则一定为半保留复制。你认为该同学说法是否正确_______________________________?原因是什么?______________

 

一半在轻带(位置),一半在重带(位置) 全部在中带 全部位于中带 3/4在轻带,1/4在重带 一半在轻带,一半在中带 不正确 用解旋酶处理后会使DNA两条链解开,无论是全保留复制还是半保留复制,都会出现一样的结果 【解析】 根据题意和图示分析可知:如果DNA的复制方式为全保留复制,则一个亲代15N-15N的DNA分子复制后,两个子代DNA分子是:一个是15N-15N ,另一个是14N-14N,在离心管中分布的位置是一半在轻带、一半在重带;如果DNA的复制方式为半保留复制,则一个亲代15N-15N的DNA分子复制后,两个子代DNA分子都是15N-14N,在离心管中分布的位置全部在中带。 (1)第二步:将亲代大肠杆菌(含15N)转移到含l4N的培养基上繁殖一代(I),一个DNA复制后会得到两个DNA。如果是全保留复制,则两个DNA中一个是两条链全是15N,属于重型;另一个是两条链全是14N,属于轻型。如果是半保留复制,则两个DNA中全都是一条链含15N,另一条链含14N,全都是中型。 第三步:将亲代大肠杆菌(含15N)转移到含14N的培养基上连续繁殖两代(Ⅱ),一个DNA复制后会得到四个DNA。如果是全保留复制,则四个DNA中-一个是两条链全是15N,属于重型;另三个是两条链全是14N,属于轻型。如果是半保留复制,则有两个DNA中都是一条链含15N,另一条链含14N,属于中型;另两个DNA两条链都是含14N,属于轻型。 (2)第一代(I)的DNA用解旋酶处理后使得两条链解旋为单链,无论半保留复制和全保留复制形成的DNA链中2条14N,2条15N,则一半在轻带位置,一半在重带位置,因此该同学说法不正确。
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考点分析:
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细胞生物都以DNA作为遗传物质,这是细胞具有统一性的证据之一。请回答:

(1)19世纪,人们发现了染色体在细胞遗传中的重要作用。在研究染色体的组成成分的遗传功能时,科学家实验设计的关键思路是_____________________________________

(2)DNA的特殊结构适合作遗传物质。DNA双螺旋结构内部碱基排列顺序代表着________,碱基排列顺序的千变万化构成了DNA分子的__________

(3)DNA的复制需要__________________酶,这些酶的合成场所是____________,从合成场所到达作用部位,共穿过____层膜结构。

(4)某个DNA片段由400对碱基组成,A+T占碱基总数和的34%,若该DNA片段复制3次,消耗鸟嘌呤脱氧核苷酸分子个数为__________

(5)经分离得到X、Y两种未知菌种,分析其DNA的碱基组成,发现X菌的腺嘌呤含量为42%,而Y菌的胞嘧啶含量为18%。可以推知两菌种中耐热性较强的是________________

 

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DNA分子由1000个碱基对组成,且两条链均被l5N标记,其中一条链上的A+T所占的比例为40%。如图表示该DNA分子的部分片段示意图,请回答下列问题:

1)由图示可知,①的名称是______________,由④⑤⑥共同构成的物质的名称是______________

2)洋葱根尖细胞能发生DNA复制的场所有____________________________DNA复制过程中,能使碱基之间的氢键断裂的酶是______________,复制时是以DNA分子的___________条链为模板进行的。

3DNA复制的意义是_____________________________________________________DNA复制遵循______________原则。

4)将该DNA分子置于不含l5N的培养液中复制三代,第三代中被15N标记的DNA分子所占的比例是____________。复制过程共需要消耗游离的胞嘧啶脱氧核苷酸的数量为___________个。

 

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按照图示1→2→3→4进行实验,可验证朊病毒是蛋白质侵染因子。朊病毒是一种只含蛋白质而不含核酸的病原微生物,题中所用牛脑组织细胞为无任何标记的活体细胞。

1)本实验采用的方法是____________

2)从理论上讲,离心后上清液中_____________(填能大量几乎不能)检测到32P,沉淀物中_____________(填能大量几乎不能)检测到32P,出现上述结果的原因是___________________

3)如果添加试管5,从试管2中提取朊病毒后先加入试管5,同时添加35S标记的( NH4235SO4,连续培养一段时间后,再提取朊病毒加入试管3,培养适宜时间后离心,检测放射性应主要位于_______________中,少量位于__________中,原因是____________________________________________

 

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请利用DNA酶做试剂,选择适当的材料用具,设计实验方案,验证“促进R型细菌转化成S型细菌的物质是DNA”,并预测实验结果,得出实验结论。

1)实验设计方案:

第一步:S型细菌中提取DNA,制备符合要求的培养基。

第二步:按照表格中的处理,制备培养基

组合编号

A

B

C

处理

_______________

加入提取出的S

细菌DNA

________________

 

 

第三步:______________________________

第四步:将接种后的培养装置放在适宜温度下培养一段时间,观察_______________生长情况。

2)预测实验结果并得出结论

实验结果:________________

 

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在含有BrdU的培养液中进行DNA复制时,BrdU会取代胸苷掺入到新合成的链中,形成BrdU标记链。当用某种荧光染料对复制后的染色体进行染色,发现含半标记DNA(一条链被标记)的染色单体发出明亮荧光,含全标记DNA(两条链均被标记)的染色单体荧光被抑制(无明亮荧光)。若将一个细胞置于含BrdU的培养液中,培养到第三个细胞周期的中期进行染色并观察。下列推测错误的是

A.1/2的染色体荧光被抑制 B.1/4的染色单体发出明亮荧光

C.全部DNA分子被BrdU标记 D.3/4的DNA单链被BrdU标记

 

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