Question

荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量。其原理是：在PCR反应体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当Taq酶催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接受到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。相关叙述错误的是（    ）

A.引物与探针均具特异性，与模板结合时遵循碱基互补配对原则

B.Taq酶可以催化子链沿着5'→3'方向延伸，需dNTP作为原料

C.反应最终的荧光强度与起始状态模板DNA含量呈正相关

D.若用cDNA作模板，上述技术也可检测某基因的转录水平

Answer

D

【解析】

PCR技术：

（1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。

（2）原理：DNA复制。

（3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。

（4）条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）

（5）过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

A、引物与探针均具特异性，与模板结合时遵循碱基互补配对原则，A正确；

B、根据图示中引物延伸的方向可以确定，Taq酶只能从引物的3’端延伸子链，催化子链沿着5’→3’方向延伸，需dNTP作为原料，B正确；

C、题干中提出“加入一个与某条模板链互补的荧光探针”，并且“每扩增一次，就有一个荧光分子生成”，因此反应最终的荧光强度与起始状态模板DNA含量呈正相关，C正确；

D、若用cDNA作模板，需要检测出总mRNA数目和某基因的mRNA数目，才能计算某基因的转录水平，D错误。

故选D。