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人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关,抗HPV的单克隆抗体可以准确检测...

人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关,抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生,以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程,请据图回答下列问题:

1)单克隆抗体制各过程中涉及的细胞工程技术有____________________,单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂,在诊断的应用上具有__________________的优点。

2)设法将B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合,常用的生物诱导因素是__________;杂交瘤细胞中染色体数目与普通淋巴细胞相比具有的特点是____________________

3)杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测,对于抗体检测呈_________性的杂交瘤细胞应进行克隆化,克隆化的方法最常用的是有限稀释法,即稀释细胞到3~10/mL,每孔加入细胞稀释液________mL(填“01”“1”或“10”),使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培养的目的。

4)由上述过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体,理由是_______________________

5)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG),该基因能激发动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的一种制备单克隆抗体技术外,请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路:_________________________

 

动物细胞培养、动物细胞融合 准确、高效、简易、快速 灭活病毒 染色体数目加倍 阳 0.1 小鼠形成的抗体对人体来说是抗原,存在着排异反应 通过基因工程向浆细胞中导入prG(或:利用核移植技术将浆细胞的细胞核移植到去核的无限增殖细胞中) 【解析】 单克隆抗体制备流程: (1)对小鼠注射特定的抗原蛋白,使小鼠产生免疫反应;(2)得到相应的B淋巴细胞;(3)将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,再用特定的选择培养基进行筛选;(4)在该培养基上,未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,只有融合的杂种细胞才能生长(这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体)(5)对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选,就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞;(6)最后,将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,或注射到小鼠腹腔内增殖,这样,从细胞培养液或小鼠腹水中,就可以提取出大量的单克隆抗体。 (1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有动物细胞培养、动物细胞融合。单克隆抗体最广泛的用途是用作诊断试剂,具有准确、高效、简易、快速等优点。 (2)细胞融合的诱导的因素有化学因素,如聚乙二醇;生物因素,如灭活病毒,物理因素,如电激。因为杂交瘤细胞含有双亲的遗传物质,故杂交瘤细胞中染色体数目与普通淋巴细胞相比具有的特点是染色体数目加倍。 (3)对于抗体检测呈阳性的杂交克隆应尽早进行克隆化,克隆化的方法最常用的是有限稀释法,即稀释细胞到3~10个细胞/mL,每孔加入细胞稀释液0.1mL,使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培养的目的。 (4)因为小鼠形成的抗体对人体来说是抗原,存在着排异反应,故上述过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体。 (5)可以利用基因工程技术将无限增殖调控基因(prG)分离出来再导入到浆细胞中,或者利用细胞核移植技术将浆细胞的细胞核移入到含有prG基因的细胞质中,获得重组细胞,最终获得单克隆抗体。
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随着我国二孩政策的实施,一些高龄夫妇借助试管婴儿技术实现了自己的愿望。请结合所学知识回答以下相关问题:

1)正常情况下,哺乳动物的受精过程主要包括:_____________、进入卵细胞膜、原核形成和融合。

2)试管婴儿技术采用了体外受精、胚胎移植等技术,在采集卵母细胞之前,需要给供卵者注射适量的促性腺激素,目的是___________________。为了保证采集到的精子能够参与受精,需要对精子进行获能处理。通常采用的体外获能方法有培养法和_____________法两种。

3)符合受精要求的精子和卵子,一般情况下都可以在______________中完成受精过程。受精过程中,卵母细胞会发生透明带反应和卵细胞膜反应,作用是__________________。体外受精后,应将受精卵移入发育培养液中继续培养,以检查受精状况和________________

4)胚胎的培养液成分除一些无机盐、有机盐类外,还需添加_____________、激素、氨基酸、___________等营养成分,以及血消等物质。当胚胎发育到适宜的阶段时,可将其取出向受体移植,或_____________保存。人的体外受精胚胎,即试管胚胎,可在________阶段移植。

 

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植物细胞工程作为一门新兴的生物技术,已经普道应用于社会生产的方方面面。请回答下列问题:

1)植物微型繁殖尼植物繁殖的一种新途径。 与常规的种子繁殖方法相比,这种微型繁殖技术的特点有:____________________________(答出两点即可)。利用植物组织培养技术可以获得脱毒苗,选材时一般切取茎尖进行组织培养,原因是:_____________________________

2)利用植物组织培养技术可以制造出神奇的人工种子,所谓人工种子,就是以植物组织培养得到的____________________等为材料,经过人工薄膜包装得到的种子。人工种皮具备透气性的作用是___________________________

3)利用植物组织培养技术可以将杂种细胞培育成杂种植株,在进行植物体细胞杂交之前,必须先利用_______________酶去除细胞壁,获得具有活力的原生质体。人工诱导原生质体间融合的方法有___________法和____________法两大类。

4)植物组织培养技术可与基因工程技术相结合获得转基因植株。将含有目的基因的细胞培养成一个完整植株的基木程序是_____________________(用流程图表示)。

 

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青蒿素是最有效的抗疟疾药物成分,但野生黄花蒿青蒿素产量低。为缓解青蒿素供应不足的状况,科学家将tms基因和tmr基因导入黄花蒿的愈伤组织从而获得了黄花蒿的冠瘿组织,改造过程用到的部分结构如图。

1)科学家利用农杆菌转化黄花蒿愈伤组织细跑的过程中,需添加酚类化合物,其目的是______________________

2)图中结构PT是基因成功转录的保证,其中结构P的作用是____________________________;从基因表达载体的组成上分析图中还缺少标记基因,标记基因的作用是____________________

3)在获得转基因的冠瘿组织过程中,构建基因表达载体时常使用两种能产生不同黏性末端的限制酶对目的基因的两端和载体分别进行切割,这样做的好处是_______________________

4)与愈伤组织相比,冠瘿组织的生长速度更快,原因可能是_____________________

 

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请回答下列有关基因工程的问题:

1)基因工程又叫做_________技术,在基因工程中使用的载体除质粒外,还有_________、动植物病毒等;早期基因工程操作都用原核细胞作为受体细胞,原因是_____________________________。基因治疗是治疗遗传病的最有效手段,分为体外基因治疗和体内基因治疗,体外基因治疗的特点是____________________________

2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是_____________;在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是_________________________________。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的__________

3)目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是_________________

 

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新快报记者与“多利羊之父”面对面,他认为克隆生物和供体会像双胞胎一样相似但并不完全一样。下列有关克隆的叙述,正确的是(   

A.植物组织培养的过程不属于克隆技术范畴

B.克隆动物的诞生涉及多种细胞工程技术,绝大多数克隆动物还存在健康问题

C.克隆生物和供体不完全相同是因为细胞内遗传物质的改变引起的

D.克隆过程中发生了细胞的增殖和分化,未发生细胞的衰老

 

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