Question

为了验证温度对酶活性的影响，某同学设计了如下实验方案和步骤：

①取三支大小相同的试管，分别编号为A、B、C。

②分别向三支试管中加入3mL浆糊和2mL新鲜的小麦淀粉酶滤液。

③振荡后，将A、B、C三支试管分别置于0℃、35℃、100℃下约5min。

④取出试管，各加入2mL斐林试剂（边加边振荡）。

⑤热水浴检验，观察试管内物质颜色的变化。

以上实验设计有三处不合理的地方，

一是_______________，应改正为__________________；原因是______________________________；

二是_________________，应改正为________________，原因是__________________________。

三是_________________，应改正为________________，原因是__________________________。

Answer

②加入3mL浆糊和2mL新鲜的小麦淀粉酶滤液 先将加入3mL浆糊分别保温到0℃、35℃、100℃下约5min ，再加入2mL新鲜的小麦淀粉酶滤液 酶有高效性，试管C加热到100℃的时候，酶已经和底物反应了 步骤③中设置的对比温度过高或者过低 在淀粉酶最适温度左右设置温度梯度 温度跨度太大，过低过高都会影响酶的活性 步骤④不能用斐林试剂检验 采用碘液检测淀粉分解情况 斐林试剂检验时需水浴加热，会干扰实验温度

【解析】

验证温度对酶活性的影响时，应先设置温度，再加入酶，由于每种酶的活性都有最适温度，在此温度下，其活性最高，偏离最适温度时，温度越低或者温度越高，其活性越小，而且温度过高会导致酶失活变性，斐林试剂检验需水浴加热，所以该实验不能用斐林试剂检验。

一、实验中步骤②不正确，三支试管加入浆糊后，应该先将三支试管放在不同温度下5min时间保温，再分别加入2mL新鲜的小麦淀粉酶滤液摇匀后，再在各自温度中维持5min，因为酶具有高效性，在试管C升温到100℃的过程中，酶已经和底物发生反应了。
二、步骤③存在错误，实验中设置的对比温度过高或者过低，温度跨度太大，都会影响酶的活性，即温度设置不合理，修改方案即减小温度梯度，在淀粉酶最适温度左右设置温度梯度。

三、步骤④存在错误，这个实验中不能用斐林试剂检验，斐林试剂检验时需水浴加热，会干扰实验温度，可采用碘液检测淀粉分解情况。