Question

内生菌是指生活于健康植物的各种组织和器官的细胞间隙或细胞内的细菌。实验人员从大豆的不同组织中分离得到内生菌，并且发现大豆内生菌对多种植物病原体具有拮抗作用。请回答下列问题：

（1）分离大豆内生菌时，先要将称取的根、茎、叶等器官用70%的酒精浸泡5min，其目的是________。再用无菌水冲洗三次，并取0．1mL最后一次冲洗过的无菌水涂布接种到培养基上，在恒温箱中培养48h，观察有无菌落产生，以验证____________。

（2）实验室对培养基灭菌的常用方法为___________。将灭菌后的培养基倒入培养皿，并立即盖上皿盖，待平板凝固后要将平板倒置，其主要目的是____________。

（3）对培养液中的内生菌进行分离并计数的接种方法为___________。不同的内生菌在平板上形成多种菌落，可根据菌落的__________等特征挑取单菌落，挑取的单菌落可利用___________法进行长期保存。

Answer

对器官的表面进行消毒 实验材料表面的微生物是否全部被消灭 高压蒸汽灭菌法 防止皿盖上的冷凝的水滴落入培养基造成污染 稀释涂布平板法 大小、形态、颜色或隆起程度 甘油管藏

【解析】

微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）分离大豆内生菌时，先要将称取的根、茎、叶等器官用70％的酒精浸泡5min，其目的是对器官的表面进行消毒。再用无菌水冲洗三次，并取0.1 mL最后一次冲洗过的无菌水涂布接种到培养基上，在恒温箱中培养48 h，观察有无菌落产生，以验证实验材料表面的微生物是否全部被消灭。
（2）实验室对培养基灭菌的常用方法为高压蒸汽灭菌法。将灭菌后的培养基倒入培养皿，并立即盖上皿盖，待平板凝固后要将平板倒置，其主要目的是防止皿盖上的冷凝的水滴落入培养基造成污染。
（3）对培养液中的内生菌进行分离并计数的接种方法为稀释涂布平板法。不同的内生菌在平板上形成多种菌落，可根据菌落的大小、形态、颜色或隆起程度等特征挑取单菌落，挑取的单菌落可利用甘油管藏法进行长期保存。