Question

干扰素（INF）通过与细胞表面相应受体结合，诱导细胞产生抗病毒蛋白而实现其抗病毒作用。科研人员将人的INF受体基因导入小鼠细胞内，在小鼠细胞中高效表达INF受体，从而提高了小鼠对INF的敏感程度，增强了其抗病毒能力。请回答下列问题：

（1）获取INF受体基因时，需要提取人体细胞中的mRNA，再加入______酶合成cDNA。提取人体细胞的mRNA时需要加入RNA酶抑制剂，以避免________。与基因组文库相比，cDNA文库中的____________（填“部分基因”或“全部基因”）可以在不同物种间交流。

（2）利用PCR扩增目的基因时，在DNA双链解开后，要适当降低体系温度，目的是___________。

（3）将含有INF受体基因的重组载体导入小鼠细胞的方法为___________，其受体细胞一般是___________。若要判断INF受体基因是否成功被导入受体细胞，需要利用基因探针进行检测，基因探针指的是____________。

Answer

逆转录 提取的mRNA被RNA酶水解； 全部基因 便于引物与模板链相结合 显微注射法 受精卵 用放射性同位素标记的含有目的基因的DNA片段

【解析】

基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因−−DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA−−分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质−−抗原−抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）cDNA文库是以mRNA为模板，通过逆转录的方法获得的，cDNA文库构建过程需要加入逆转录酶。提取人体细胞的mRNA时需要加入RNA酶抑制剂，目的是避免提取的mRNA被机体的RNA酶催化水解。与基因组文库相比，cDNA文库中的全部基因不含有内含子序列，可以在不同物种间进行交流。

（2）利用PCR扩增目的基因时，在DNA双链解开后.要适当降低体系温度，目的是便于引物与模板链相结合。若温度过高，引物不能与模板链结合。
（3）将含有INF受体基因的重组载体导入小鼠细胞的方法为显微注射法，动物基因工程的受体细胞一般是受精卵，进行DNA分子杂交技术时所用的基因探针是指用放射性同位素标记的含有目的基因的DNA片段。